MD講座:自動(dòng)化高通量平臺蛋白表達(dá)體系中優(yōu)化及篩選
瀏覽次數(shù):4966 發(fā)布日期:2016-9-12
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在酶的定向進(jìn)化 、組合合成生物學(xué)、微生物表面展示技術(shù)及高通量克隆構(gòu)建等技術(shù)領(lǐng)域中,如何能做到高通量快速挑選克隆以提高工作效率?QPix微生物自動(dòng)化高通量篩選平臺可幫助實(shí)現(xiàn)省時(shí)省力。
本講座將介紹其在蛋白質(zhì)科學(xué)方面一種新的應(yīng)用----高通量快速篩選蛋白質(zhì)的可溶性表達(dá)條件,為進(jìn)一步的生物化學(xué)、結(jié)構(gòu)學(xué)研究打下基礎(chǔ)。
工作流程:
1、運(yùn)用C端融合表達(dá)二氫葉酸還原酶(DHFR)的載體系統(tǒng)高通量的篩選具有正確讀碼框的隨機(jī)PCR克隆質(zhì)粒
2、運(yùn)用分段式的GFP熒光活性篩選系統(tǒng)快速分選出細(xì)胞內(nèi)有目標(biāo)蛋白可溶性表達(dá)的克隆
3、運(yùn)用體外熒光篩選技術(shù)區(qū)分出可溶性蛋白表達(dá)量的高低。
圖1 運(yùn)用QPix進(jìn)行高通量蛋白可溶性篩選整體流程示意圖
圖2 結(jié)合CloneSelect Imager觀察熒光強(qiáng)弱

運(yùn)用這種方法可以快速高通量判斷蛋白可溶性的強(qiáng)弱
日期:2016年9月22日,周四
時(shí)間:10:00-11:00(北京時(shí)間)
主講人:鄧瑋博士 國家蛋白質(zhì)科學(xué)中心 規(guī);鞍踪|(zhì)制備系統(tǒng)運(yùn)維主任
1999-2003年 武漢大學(xué)化學(xué)與分子科學(xué)學(xué)院 本科
2003-2008年 中科院上海有機(jī)化學(xué)研究所 生命有機(jī)化學(xué)博士,從事天然產(chǎn)物生物合成研究
2008-2012年 美國密西根大學(xué)生化系雷鳴教授課題組從事DNA損傷修復(fù)途徑中重要復(fù)合物SOSS的功能及結(jié)構(gòu)研究,成功解析了多個(gè)重要復(fù)合物結(jié)構(gòu)并進(jìn)行相關(guān)功能研究獲得重要發(fā)現(xiàn)。
2012年-至今 國家蛋白質(zhì)科學(xué)中心,擔(dān)任規(guī)模化蛋白質(zhì)制備系統(tǒng)主任,從事自動(dòng)化高通量生物科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究工作,參與設(shè)計(jì)了多套自動(dòng)化生物科研系統(tǒng),并進(jìn)行相關(guān)科研應(yīng)用開發(fā)。