現(xiàn)代分子生物學(xué)的發(fā)展,使核酸定量早已成為實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)實(shí)驗(yàn)。核酸定量法主要分為光吸收檢測(cè)法和熒光檢測(cè)法。相對(duì)光吸收檢測(cè)法,熒光定量法憑借更高的檢測(cè)靈敏度(高于光吸收檢測(cè)法3個(gè)數(shù)量級(jí)),更高的檢測(cè)特異性(特異性識(shí)別雙鏈/單鏈DNA),目前已成為核酸快速精準(zhǔn)定量的首選方法。
針對(duì)雙鏈DNA進(jìn)行少樣品量熒光法核酸定量,一直以來常用的方法是:結(jié)合Qubit熒光檢測(cè)儀,使用Qubit熒光染料進(jìn)行定量。然而這種檢測(cè)方法,只能單樣品依次檢測(cè),通量明顯受限,并且試劑耗材成本高,顯然無法滿足高通量的核酸定量檢測(cè)需求。
對(duì)此,德國(guó)BMG多功能酶標(biāo)儀結(jié)合Qubit核酸定量熒光染料光譜特征(圖1),在BMG熒光檢測(cè)酶標(biāo)儀中優(yōu)化完善光路檢測(cè)系統(tǒng),使其核酸熒光定量線性度均可達(dá)到R2>0.9999(圖2),且均可支持超高靈敏度的核酸定量(線性檢測(cè)范圍50pg/μl-100ng/μl)。同時(shí),BMG這些高性能檢測(cè)方案,均可在96/384孔板中實(shí)現(xiàn),不僅突破了Qubit檢測(cè)通量低的限制,并大大降低了試劑耗材成本(Qubit 200μl檢測(cè)體系VS BMG 96孔板100μl檢測(cè)體系VS BMG 384孔板20μl檢測(cè)體系),為高通量,精準(zhǔn),快速,高效,低成本的核酸定量提供了完美的解決方案。
目前,該解決方案已在國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室廣泛成熟應(yīng)用起來。如國(guó)內(nèi)NGS企業(yè)的典型代表-華大基因,目前已為其全部NGS合作實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)了三十多臺(tái)BMG多功能酶標(biāo)儀,建立了高通量核酸精準(zhǔn)定量的新標(biāo)準(zhǔn)。
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