分光光度計，又稱光譜儀(spectrometer)，是將成分復(fù)雜的光，分解為光譜線的科學(xué)儀器。常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。分光光度計已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。

物理意義

當一束平行單色光垂直通過某一均勻非散射的吸光物質(zhì)時， 其吸光度 A 與吸光物質(zhì)的濃度 c 及吸收層厚度 ι 成正比，而透光度 T 與 c、ι 成反比，即，A = lg(1/T) =k * ι* c    → c = A / (k * ι）

這就是光吸收的基本原理Beer-Lambert’s law 比爾—朗伯定律

其中，

• A 為吸光度

• T 為透射比(透光度)是出射光強度（l_t）比入射光強度(l₀)

• k 為摩爾吸收系數(shù)，它與吸收物質(zhì)的性質(zhì)及入射光的波 長 λ 有關(guān)

• c 為吸光物質(zhì)的濃度,單位為 mol/L

• ι為吸收層厚度，一般以 cm 單位

VWR 推出mySPEC 系列多功能分光光度計，適用于微量核酸和蛋白質(zhì)樣本的濃度和純度測定。

mySPEC Twin 系列具有一個額外的比色皿端口，可用于測量細胞密度或酶活性。預(yù)設(shè)測定程序，針對不同應(yīng)用，實現(xiàn)快速、完整的自動數(shù)據(jù)分析。

應(yīng)用包括RNA和DNA的濃度和純度測定、蛋白質(zhì)測量（A280，Bradford， Lowry，BCA，Pierce 660 法）、標記效率測定、比色法測定酶活性和細胞密度測量。

工作原理

mySPEC 技術(shù)

通過靜電形成液柱，起始最長光程路徑（1 mm）。將下光纖表面移動靠近上光纖表面，形成較短光程（最短可達0.05 mm）：通過靜電拉開樣品，然后進行擠壓。

1.  使用mySPEC移液器將1 µl樣品直接滴到下光纖表面上

2.  閉合取樣臂

3.  形成樣品液柱，調(diào)節(jié)最佳光程，然后開始測量。由于具有“自動開始”功能，無需按“測量”。幾秒內(nèi)即可顯示測量結(jié)果，可輕松保存為文檔或進行打印

4.  只需簡單擦拭光纖表面，即可進行下一次測量

產(chǎn)品優(yōu)勢

利用分光光度計通用mySPEC系列，用戶可以對極少樣品量中的所含的核酸和蛋白質(zhì)進行量。Twin系列擁有額外的比色皿用端口，以便進行細胞密度或酶活性測量。預(yù)配置模組可對一系列應(yīng)用進行快速、全自動數(shù)據(jù)分析，包括RNA和DNA濃度和純度，蛋白測量(A280, Bradford, Lowry, BCA, Pierce 660)，標簽效率測定，酶活性比色測定和細胞密度測量。

• 只需1 µl樣品

• 操作簡單，無需比色皿，只需移液器即可測量(<5秒)，然后擦掉

• 測量范圍從2  ng/µl到15 µg/µl(ds DNA)，避免易于出錯的稀釋和計算

• Twin系列結(jié)合微量和比色皿功能，可對樣品進行溫度控制(30-40 °C)和攪拌

(0/50/1000每分鐘）

• 獨立式8.4英寸觸摸屏版本可選

• 用戶定義純度設(shè)置后可自動進行數(shù)據(jù)分析

最小加樣量

mySPEC 超微量紫外可見光分光光度計可用于微量體積的濃度和純度測定，針對不同樣品，其最小加樣量不同。

核酸：1 μl

高濃度核酸：1,3 - 2 μl

蛋白：2 μl

Bradford、BCA、Lowry或Protein Pierce 660 nm試劑：2 μl

微生物細胞懸浮液：2 μl

測試結(jié)果對比

我們采用mySPEC和某品牌的同類產(chǎn)品對6份不同濃度的dsDNA樣品進行了測定，得到以下數(shù)據(jù)，

通過對比后我們發(fā)現(xiàn)：

• 兩種儀器的測量結(jié)果相同

• mySPEC的測量結(jié)果具有更為出色的再現(xiàn)性（標準偏差�。�

結(jié)果表明：mySPEC的測量精確度更高。如此看來，這款分光光度計真的很skr！

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