IL4（interleukin 4）該基因編碼的蛋白質(zhì)是由活化的T細胞產(chǎn)生的多效細胞因子。IL4能夠結(jié)合其受體IL4Ra，對B細胞，T細胞，肥大細胞，巨噬細胞等具有免疫調(diào)節(jié)作用。IL4在哮喘模型中能夠誘導B細胞合成大量IgE，招募嗜酸性粒細胞募集，增強ASM收縮，促進氣道重塑等過程^[1]。

IL4RA（interleukin 4 receptor α）該基因編碼IL4受體的α鏈，屬于I型跨膜蛋白，在免疫反應(yīng)中起著重要作用。IL4R可以與IL4和IL13結(jié)合以調(diào)節(jié)IgE的產(chǎn)生，并且與IL4的結(jié)合可以促進Th2細胞的分化，從而誘導哮喘的發(fā)生^[2]。

因此，IL4和IL4R的拮抗劑可降低體內(nèi)IL4的水平，并可對哮喘患者發(fā)揮抗炎和抗免疫作用。IL4和IL4R被認為是治療過敏和哮喘的明星靶標。

藥物研發(fā)現(xiàn)狀

Dupixent（dupilumab）是Sanofi和Regeneron推出的靶向IL-4/IL-13的抗體藥物，其研發(fā)進展也是走在世界前列。

百奧賽圖B-hIL4/hIL4RA 小鼠哮喘模型小鼠

——助力藥物研發(fā)


 

百奧賽圖B-hIL4/hIL4RA小鼠

蛋白表達分析
 

1. 小鼠血清中hIL4表達檢測

ELISA分析C57BL/6和純合B-hIL4/hIL4RA小鼠血清中IL4蛋白表達

結(jié)果顯示：在C57BL/6小鼠血清中可檢測到mIL4蛋白表達，B-hIL4/hIL4RA小鼠血清中可檢測到hIL4蛋白表達。

2. 小鼠脾細胞中hIL4RA表達檢測
 

B-hIL4/hIL4RA人源化小鼠脾細胞活化及流式檢測

結(jié)果顯示：在C57BL/6小鼠中可檢測到mIL4RA⁺細胞。在B-hIL4/hIL4RA純合鼠中，可檢測到hIL4RA⁺細胞。

基于B-hIL4/hIL4RA小鼠

hIL4RA Ab 藥效評估

1. 哮喘模型藥效評估方案
 

2. 小鼠哮喘模型肺泡灌洗液（BALF）中免疫細胞分析
 

BALF（ Bronchoalveolar Lavage Fluid ）炎性細胞分析結(jié)果顯示，Dupixent Analog給藥組炎性反應(yīng)明顯減緩。

3. 小鼠哮喘模型血清中IgE檢測
 

實驗終點收集小鼠血清樣本，檢測分析IgE水平。再利用Dupixent Analog處理后，與陽性對照相比給藥組IgE水平明顯降低。

基于B-hIL4/hIL4RA小鼠

哮喘模型建立及H&E染色

H&E 染色

B-hIL4/hIL4RA小鼠建立哮喘模型后進行肺組織H&E染色。結(jié)果顯示相對于PBS對照組，哮喘陽性組表現(xiàn)出明顯的斑片狀支氣管周圍炎性浸潤，主要由嗜酸性粒細胞和淋巴細胞組成。

總結(jié)

1、百奧賽圖B-hIL4/hIL4RA純合小鼠能夠表達人源IL4和IL4RA蛋白；

2、百奧賽圖已經(jīng)建立了穩(wěn)定的哮喘模型，并基于B-hIL4/hIL4RA小鼠能夠有效評價人源IL4RA抗體藥效。

參考文獻

1.Vatrella A，et al.,Dupilumab: a novel treatment for asthma.J Asthma Allergy. 2014 Sep 4;7:123-30.

2. Gandhi, Namita A., et al. Targeting key proximal drivers of type 2 inflammation in disease. Nature Reviews Drug Discovery 15.1 (2016): 35-50. 

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