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講座:核酸標準物定量檢測的數(shù)字PCR方法轉換

瀏覽次數(shù):3255 發(fā)布日期:2020-8-26  來源:本站 本站原創(chuàng),轉載請注明出處

課程內容

數(shù)字PCR是第三代PCR技術,可量化低豐度DNA拷貝數(shù),實現(xiàn)高精度和真實地對DNA拷貝數(shù)進行絕對定量。此外,在不同樣本的DNA提取過程中,數(shù)字PCR被認為對可以提取的PCR抑制物的耐受度高于熒光定量PCR。在實驗室建立數(shù)字PCR檢測方案時,需要考慮不同的方面,其包括(但不限于)確保有效區(qū)分陽性和陰性的分區(qū),調整所使用的PCR預混液的類型,優(yōu)化引物特異性,引物和探針濃度比,以及檢測性能評估。此講座對上述問題和其他方面提供了信息參考,并為將現(xiàn)有的熒光定量PCR方法轉換為數(shù)字PCR方法提供了建議。

 

上面提到了標準物質需要在核酸方面進行檢測,還有許多生物制藥需要在下游蛋白層面進行研究,例如:宿主蛋白(HCP)構成生物制品生產工藝中雜質的主要組成,其殘留可能會引起人體內引發(fā)免疫反應,在生物制品中需要對HCP進行檢測,本報告將對HCP的來源,質控和檢測方法等給大家做介紹,同時在細胞治療研發(fā)中需要對藥效進行體外評價,對于基因修飾/改造的細胞需要對目的基因存在,表達和表達產物的生物學作用進行必要的研究,成像系統(tǒng)都在其中發(fā)揮著重要作用。

 

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