2020年至今，COVID-19席卷全球，目前已造成世界數(shù)千萬人感染，數(shù)百萬人失去生命。新冠病毒致病機制是通過病毒表面的刺突蛋白(S蛋白)與肺部上皮細胞表面ACE2蛋白質(zhì)結(jié)合，隨后，病毒會趁機侵入人體細胞。人體內(nèi)也會啟動相應(yīng)的免疫程序，產(chǎn)生針對新冠病毒S蛋白的抗體稱之中和性抗體。它們可以結(jié)合病毒表面S蛋白，阻斷S蛋白與ACE2的結(jié)合，從而阻斷病毒進入細胞。故能夠在血清中檢測中和性抗體的親和力顯得尤為重要以及康復者或者疫苗注射者血清（漿）內(nèi)中性抗體的結(jié)合力顯得尤為重要。

1. 首先它是發(fā)揮抗病毒效應(yīng)的主要力量；

2. 目前我國對重癥病人和危重癥病人采取康復者血漿治療；

3. 傳統(tǒng)標準的VNTs，亦或是基于Elisa的sVNTs，都不能提供關(guān)于是通過低濃度弱結(jié)合親和力的NAbs還是低濃度緊密結(jié)合親和力的NAbs來實現(xiàn)病毒中和的信息；

4. 市面上主流的分子互作系統(tǒng)都是基于表面結(jié)合的原理，而我們知道，在體內(nèi)的結(jié)合并非發(fā)生在結(jié)合表面上，故這些方法不能完全反映出真實的結(jié)合狀態(tài)；

英國劍橋大學科學家團隊經(jīng)過不懈努力，在Fluidity One-W微流控擴散檢測儀后,又推出了一款專門針對病毒檢測的儀器(Fluidity One-W Serum),它可以在血清中（50ul）直接檢測病毒抗體濃度及結(jié)合強弱，該方法不需要固定，能夠在接近生命體的環(huán)境中檢測，得到的數(shù)據(jù)也就更貼近真實值。
 

優(yōu)勢

1. 在溶液中檢測，無需表面固定，無非特異性結(jié)合

2. 在更接近天然的狀態(tài)下分析相互作用

3. 直接在最小稀釋血清中進行抗體親和力分析和濃度測定，以進行全面的免疫反應(yīng)評估

4. 簡單易操作

5. 可以迅速測定蛋白是否降解

6. 可以進行化學計量學測定，可以測定分子間結(jié)合比例

7. 一次性芯片減少交叉污染

應(yīng)用案例
案例1

在新冠疫情爆發(fā)前對照血清中測量了重組ACE2和S1結(jié)合的KD值。隨著S1濃度的增加，有效流體動力學半徑（Rh）也增加了，說明了蛋白質(zhì)復合物ACE2–S1的有效結(jié)合（圖B）。同樣，在對照血清測量了單克隆Nab和S1結(jié)合的KD值（圖D）。將NAb添加到濃度為10 nM的熒光標記的ACE2和濃度為50 nM的S1的混合物中會導致Rh減少，因為NAb1與S1結(jié)合，從而從復合物中置換出ACE2。通過ACE2-S1和Nab-S1親和力，并基于競爭結(jié)合模型預測抑制等溫線(圖D紅色)，這與實驗得到的抑制等溫線非常一致（圖D黑色）。之后還將該方法應(yīng)用于兩個新冠呈陽性的病人的血清中。

該款儀器的誕生實現(xiàn)了溶液中受體結(jié)合競爭分析，可以測定多克隆血清抗體的有效解離常數(shù)(KD)及其濃度；為選擇恢復期血漿治療供體提供鑒定；為治療性抗體開發(fā)和疫苗開發(fā)的候選先導物提供鑒定。
案例2

使用微流體抗體親和譜分析（MAAP），確定了42名血清陽性患者血漿樣本中抗SARS-CoV-2抗體的總親和力和濃度，其中23名經(jīng)PCR測試確認為SARS-CoV2陽性。研究發(fā)現(xiàn)，盡管具有相似的抗體濃度，抗RBD抗體的解離常數(shù)（Kd）卻超過了兩個數(shù)量級，從80 pM到25 nM。該款血清抗體檢測儀（Fluidity One-W Serum）測定結(jié)果與基于細胞的中和測定法非常吻合。(如上圖)。最后確定了針對SARS-CoV-2的免疫反應(yīng)具有識別其他冠狀病毒的RBD表位的能力，這表明活化的記憶B細胞可能會產(chǎn)生中和的抗體，即使由其他未來的SARSCoV-2變體觸發(fā)也是如此�？贵w濃度和親和力之間的關(guān)系可能會影響血漿置換，并靶向適當?shù)谋砦灰赃M行有效中和。

從全文結(jié)果來看只有具有非常高的Kd值的患者才應(yīng)被視為血漿置換的獻血者，這是常規(guī)方法無法充分獲取的。故血漿總免疫球蛋白對SARS-CoV-2的親和力可作為評價SARS-CoV-2免疫應(yīng)答質(zhì)量的指標，該款血清抗體檢測儀（Fluidity One-W Serum）有助于選擇最有效的樣本進行治療性血漿置換。

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