作原位雜交、Northern 雜交的封堵劑,對(duì)于探針為 RNA 的雜交試驗(yàn)尤其適用。
成份 編號(hào) 規(guī)格
精提酵母 tRNA 溶液(5mg/mL) 220121 1.5 mL
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年
自備試劑 :無(wú)水乙醇,75%乙醇
使用方法
一:本產(chǎn)品作核酸助沉劑使用
注:由于 tRNA 是多聚核苷酸激酶和末端轉(zhuǎn)移酶的底物,因此如果回收的 DNA 或
RNA 要用于此類反應(yīng),就不能使用 tRNA 作為助沉劑,需要改用糖原或聚丙烯酰
胺(需要從本公司另購(gòu))。如果回收的 RNA 或 DNA 要用于 RT-PCR 和 PCR 擴(kuò)增,
最好先確認(rèn)所用引物不會(huì)跟酵母 tRNA 結(jié)合,否則可能會(huì)產(chǎn)生非特異擴(kuò)增。
1. 在核酸(DNA 或/和 RNA)溶液中,加入適當(dāng)種類和濃度的鹽離子,鹽離子不同
其終濃度也不相同,具體如下:
鹽 終濃度
NH4OAc (醋酸銨) 0.5 M
NaCl (氯化鈉) 0.25 M
NaOAc (醋酸鈉) 0.3 M
2. 加入本產(chǎn)品使其終濃度為 20 ug/mL,混合均勻。
3. 加入兩倍體積的自備無(wú)水乙醇,混合均勻。
4. 冰上放置 15 分鐘。
5. 12000-15000 g 離心 15 分鐘以上,小心移棄上清。
6. 用 1mL 75%乙醇洗一次(即加入 1mL 75%乙醇,振蕩混勻后 12000-15000
g 離心 5 分鐘,小心移棄上清)。
7. 短暫離心數(shù)秒,小心移棄殘留液體。
8. 將沉淀溶于適當(dāng)緩沖液中待用。二:本作為雜交封堵劑
本產(chǎn)品可以作為原位雜交液、Northern 雜交液和 RNA 斑點(diǎn)雜交液的封堵劑,
也可以作為 Southern 雜交液和 DNA 斑點(diǎn)雜交液的封堵劑,但不適于作為菌斑雜
交的封堵劑,其在雜交液或預(yù)雜交液中的終濃度為 100ug/mL。如果使用 RNA 探
針,最好使用 tRNA 精提液做封堵劑,以保護(hù) RNA 探針。
北京天凈沙目前擁有5萬(wàn)多種自產(chǎn)科研試劑產(chǎn)品,包括2萬(wàn)多種PCR和LAMP檢測(cè)產(chǎn)品(包括動(dòng)物病原、植物病原、GMO轉(zhuǎn)基因、種源性、中藥材真?zhèn)、抗藥性、SNP)、數(shù)千種即用型溶液,數(shù)千種即用型DMSZ和ATCC培養(yǎng)基、數(shù)千種酶活性和代謝物檢測(cè)產(chǎn)品(酶法)、數(shù)千種質(zhì)粒和菌種、數(shù)千種分子生物學(xué)試劑、數(shù)千種組織化學(xué)和免疫組化產(chǎn)品等。