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qEV尺寸排阻外泌體分離柱
產(chǎn)品詳情

qEV尺寸排阻分離柱是由新西蘭IZON公司研發(fā)和生產(chǎn)的一種基于尺寸排阻色譜法(Size Exclusion Chromatography, SEC)原理的外泌體分離-純化技術(shù)。該技術(shù)具有簡(jiǎn)便、快速、容易標(biāo)準(zhǔn)化操作的特點(diǎn),只需要15min就可以從多種類型樣本中提取到完整的高純度外泌體。相較于其他方法,qEV所提取的外泌體純度更高、濃度更高、活性也更高,還可以重復(fù)使用。qEV分離的外泌體尤其適用于外泌體蛋白組和外泌體功能實(shí)驗(yàn)。
IZON公司qEV尺寸排阻外泌體分離柱提供兩種分離范圍。常用的 70 nm qEV 色譜柱對(duì) 70 nm 至 1000 nm 的顆粒具有最佳回收率,而 35 nm 色譜柱的最佳回收率范圍為 35 nm 至 350 nm。
qEV尺寸排阻外泌體分離柱工作原理
qEV分離柱基于尺寸排阻色譜原理工作,即溶液中的分子和顆粒在通過由多孔樹脂顆粒組成的色譜柱時(shí)按其尺寸進(jìn)行分離。在qEV分離中,較大的顆粒無法進(jìn)入樹脂中的孔隙,而是相對(duì)較快地流過樹脂。相反,小于分離范圍下限(35 nm 或 70 nm)的顆粒則會(huì)進(jìn)入樹脂中的孔隙,這會(huì)減慢它們的流動(dòng)速度。通過這種基于尺寸大小的分離,EVs 和可溶性蛋白質(zhì)以高分離度分離,由此可以獲得純化體積。
qEV 分離柱廣泛用于細(xì)胞外囊泡 (EV) 領(lǐng)域,其原因不僅僅在于其易用性和溫和、高效。更重要的是qEV 分離柱使用尺寸排阻色譜 (SEC) 原理將污染的可溶性蛋白與外泌體和其他 EV 分離。IZON公司的 Gen 2 qEV 分離柱柱可去除大約 99% 的可溶性蛋白質(zhì)——提供比現(xiàn)有系列(傳統(tǒng) qEV 色譜柱)更高純度的樣品。由于非 EV 組件的共同分離會(huì)影響下游應(yīng)用和分析,因此 EV 分離中的純度問題是一個(gè)重要問題。使用 IZON公司的qEV 分離柱分離得到的EV,可以直接進(jìn)行下游分析,包括可調(diào)電阻脈沖傳感、電子顯微鏡、蛋白質(zhì)組學(xué)和 RNA 分析。
qEV尺寸排阻外泌體分離柱操作流程
1. 用洗脫緩沖液沖洗柱子。
2. 裝入500μL樣品。
3. 最開始的3ml是空隙體積,繼續(xù)向分離柱中添加PBS以洗脫囊泡(外泌體)。
4. 收集空隙體積后的1.5mL液體為高純度外泌體。
qEV尺寸排阻外泌體分離柱優(yōu)勢(shì)
高純度:去除99%以上的可溶性蛋白質(zhì),去除95%以上高密度脂蛋白
無損傷:保持細(xì)胞外囊泡的完整性和生物功能
標(biāo)準(zhǔn)化:每根分離柱均經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)化、質(zhì)量保證,并通過ISO13485標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)證
可靠性:只要15min就可以得到完整外泌體樣本,已經(jīng)在大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)得到證實(shí)
適用性:適用于多種類型樣品的外泌體提取,包括:血清、血漿、尿液、細(xì)胞上清、腦脊液、唾液等;尤其適用于外泌體功能研究中,用于細(xì)胞培養(yǎng)或動(dòng)物注射的高純度外泌體的獲得
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