BTP-泛素化定量蛋白組學(xué)研究

泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)了真核生物體內(nèi)80%~85%的蛋白質(zhì)降解。此外，泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位，調(diào)控包括細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA 損傷修復(fù)以及免疫應(yīng)答等在內(nèi)的多種細(xì)胞活動(dòng)。

百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF質(zhì)譜平臺，Orbitrap Fusion質(zhì)譜平臺，Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，推出泛素化定量蛋白組分析服務(wù)技術(shù)包裹，您只需要將您的實(shí)驗(yàn)?zāi)康母嬖V我們并將您的樣品寄給我們，我們會負(fù)責(zé)項(xiàng)目后續(xù)所有事宜，包括蛋白提取、蛋白酶切、泛素化肽段富集、肽段分離、質(zhì)譜分析、質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)分析、生物信息學(xué)分析。

由于翻譯后修飾的蛋白質(zhì)在生物樣本中含量低、動(dòng)態(tài)范圍廣，質(zhì)譜分析前需要對修飾進(jìn)行富集以提高其豐度，然后利用傳統(tǒng)的定量蛋白組分析手段對富集得到的泛素化肽段樣品進(jìn)行定量分析。百泰派克公司基于發(fā)表在Nature Protocol上的文章：Large-scale identification of ubiquitination sites by mass spectrometry建立了該分析服務(wù)的實(shí)驗(yàn)平臺，采用完全復(fù)制的方式；首先對泛素化的蛋白進(jìn)行胰酶消化，在賴氨酸的修飾位點(diǎn)上會產(chǎn)生兩個(gè)甘氨酸的殘基(K-GG)，利用CST公司提供的針對該殘基的試劑盒對泛素化肽段進(jìn)行特異性的富集。我們使用HPLC對樣品進(jìn)行預(yù)分離，再使用抗特殊殘基結(jié)構(gòu)的抗體進(jìn)行泛素化肽段的富集，極大地提高了泛素化蛋白的鑒定量。同時(shí)，在Nature Protocl文章基礎(chǔ)上，為了鑒定和定量更多的乙�；�肽段，我們在酶切過程中會使用2-3中不同的酶對蛋白樣品進(jìn)行酶切，保證帶有乙�；�位點(diǎn)的肽段以高離子化效率的方式進(jìn)入質(zhì)譜進(jìn)行分析，排除因?yàn)殡亩伍L度不合適、離子化效率低造成的乙�；�信息的丟失。

泛素化修飾研究路線

1. 如果您提供的是組織樣品，請您干冰將組織樣品寄給我們；植物組織樣本大于400mg，血液樣品至少2ml(血漿注意用EDTA防凝)，血清2ml，尿液10ml，動(dòng)物組織樣品至少2g，細(xì)胞樣品為1X10^8個(gè)細(xì)胞，酵母、微生物等干重400mg。

2. 如果您提供的是蛋白樣品，請您保證蛋白總量在2-5mg；蛋白提取時(shí)使用普通的組織、細(xì)胞裂解液即可。

3. 樣品運(yùn)輸：請使用足量的干冰運(yùn)輸，并且盡量選用較快的郵遞方式，以降低運(yùn)輸過程中樣品降解的可能性。

4. 在正式實(shí)驗(yàn)之前，我們都會對您提供的樣品進(jìn)行檢測，檢測合格后開始正式試驗(yàn)。

泛素化修飾研究案例

在技術(shù)報(bào)告中，百泰派克會為您提供詳細(xì)的中英文雙語版技術(shù)報(bào)告，報(bào)告包括：

1. 實(shí)驗(yàn)步驟（中英文）
2. 相關(guān)的質(zhì)譜參數(shù)（中英文）
3. 鑒定的泛素化位點(diǎn)的詳細(xì)信息
4. 質(zhì)譜圖片
5. 原始數(shù)據(jù)

您只需下單-寄送樣品 百泰派克一站式服務(wù)完成：樣品處理-上機(jī)分析-數(shù)據(jù)分析-項(xiàng)目報(bào)告

翻譯后修飾蛋白組分析
組蛋白翻譯后修飾分析
4D蛋白質(zhì)組學(xué)
DIA定量蛋白質(zhì)組學(xué)
基于Label Free的定量蛋白組分析
基于標(biāo)簽的蛋白質(zhì)定量技術(shù)-iTRAQ，TMT，SILAC
MRM/PRM定量蛋白組學(xué)分析