高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用

高效液相色譜，利用經(jīng)高壓泵加壓后的流動(dòng)相帶動(dòng)待測(cè)物各組分通過色譜柱，因各組分從色譜柱中流出的速度不同，從而實(shí)現(xiàn)不同組分的分離，各組分先后從柱內(nèi)流出后通過檢測(cè)器的后被轉(zhuǎn)化成電信號(hào)，再由數(shù)據(jù)系統(tǒng)收集處理，最終得到色譜圖，與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對(duì)比，通過保留時(shí)間進(jìn)行定性分析，也可通過計(jì)算色譜峰面積和峰高等進(jìn)行定量分析。

高效液相色譜法具有以下特點(diǎn)

(1)分離效能高由于新型高效微粒固定相填料的使用，液相色譜填充柱的柱效可達(dá)2*10^3-5*10^4塊/m理論塔板數(shù)，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣相色譜填充柱10^3塊/m理論塔板數(shù)的柱效。

(2)選擇性高由于液相色譜柱具有高柱效，并且流動(dòng)相可以控制和改善分離過程的選擇性。因此，高效液相色譜法不僅可以分析不同類型的有機(jī)化合物及其同分異構(gòu)體，還可分析在性質(zhì)上極為相似的旋光異構(gòu)體，并已在高療效的合成藥物和生化藥物的生產(chǎn)控制分析中發(fā)揮了重要作用。

(3)檢測(cè)靈敏度高在高效液相色譜法中使用的檢測(cè)器大多數(shù)都具有較高的靈敏度。如被廣泛使用的紫外吸收檢測(cè)器，最小檢出量可達(dá)10^(-9)g;用于痕量分析的熒光檢測(cè)器，最小檢出量可達(dá)10^(-12)g。

(4)分析速度快由于高壓輸液泵的使用，相對(duì)于經(jīng)典液相(柱)色譜，其分析時(shí)間大大縮短，當(dāng)輸液壓力增加時(shí)，流動(dòng)相流速會(huì)加快，完成一個(gè)樣品的分析時(shí)間僅需幾分鐘到幾十分鐘。

高效液相色譜法除具有以上特點(diǎn)外，它的應(yīng)用范圍也日益擴(kuò)展。由于它使用了非破壞性檢測(cè)器，樣品被分析后，在大多數(shù)情況下，可除去流動(dòng)相，實(shí)現(xiàn)對(duì)少量珍貴樣品的回收，亦可用于樣品的純化制備。

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