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蛋白質(zhì)印跡法（免疫印跡試驗(yàn)）即Western Blot。它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法
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蛋白質(zhì)印跡法（免疫印跡試驗(yàn)）即Western Blot。它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法，是將聚丙烯酰胺電泳分離后的細(xì)胞或組織總蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物NC膜或PVDF膜上，然后用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質(zhì)檢測技術(shù)，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于蛋白水平的表達(dá)研究、抗體活性檢測和疾病早期診斷等多個方面。
客戶前期準(zhǔn)備
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樣本類型 |
樣本要求（細(xì)胞、組織、蛋白樣本） |
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細(xì)胞樣本 |
細(xì)胞懸液或貼壁細(xì)胞：每份樣本至少 2×107 細(xì)胞，在運(yùn)輸前將培養(yǎng)液充滿整個容器，25T細(xì)胞瓶常溫運(yùn)輸。 |
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凍存細(xì)胞：收獲培養(yǎng)的細(xì)胞后，離心去除培養(yǎng)液，PBS洗2次，立即置液氮中快速冷凍。液氮冷凍半小時后，保存于-80°C冰箱，干冰運(yùn)輸。提供量至少 2×107 細(xì)胞。 |
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組織樣本 |
組織樣品預(yù)處理： 采集新鮮組織，組織塊以PBS或生理鹽水清洗干凈，切為小塊，放入液氮或-80°C冰箱中保存。提供動物組織＞400mg/樣本。 |
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運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸。 |
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蛋白樣本 |
1. 裂解樣品總蛋白量>2mg/ml；細(xì)胞樣品總蛋白濃度＞1mg/ml；組織樣品總蛋白濃度10-15mg/ml。在實(shí)驗(yàn)前會進(jìn)行質(zhì)檢，以保證其質(zhì)量達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求； 2. 在提取總蛋白時，加入蛋白酶抑制劑和磷酸蛋白酶抑制劑(尤其對于檢測磷酸化蛋白)。 |
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運(yùn)輸：加在緩沖液中(蛋白裂解液)低溫運(yùn)輸。 |
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客戶提供一抗 |
運(yùn)輸：依據(jù)說明書，一般4°C或-20°C運(yùn)輸，嚴(yán)禁反復(fù)凍融。 |
Western blot參考價格及項(xiàng)目周期
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服務(wù)項(xiàng)目 |
服務(wù)時間 |
價格 |
服務(wù)內(nèi)容 |
交付結(jié)果 |
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蛋白提取 |
1周 |
30元/樣品 |
蛋白提取定量 |
蛋白定量結(jié)果 |
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Western blot |
1-2周 |
普通蛋白1000元/膜(單個蛋白)；磷酸化蛋白1200元/膜(單個蛋白) |
Western blot法檢測蛋白表達(dá)量 |
膠片和電子版圖片、灰度值分析結(jié)果、實(shí)驗(yàn)報(bào)告 |
