磷酸鹽緩沖液,Tris緩沖液和檸檬酸緩沖液等是生物學(xué)實驗中常用的緩沖液,也是PeproTech重組細胞因子和蛋白溶解所需的常用緩沖液。然而,這些緩沖液的配制比較麻煩,尤其當要獲得特定pH值的緩沖液時,調(diào)節(jié)pH值是費力、費時的事情。對于Tris等緩沖液等,pH計是無法準確測量其pH值的。
那么,有沒有簡便的方法來配制特定濃度和pH值的上述緩沖液呢?
美國PeproTech公司為此精心設(shè)計開發(fā)出一個網(wǎng)上實用工具--http://www.peprotech-asia.com/convertor/ch/phosphate.html。只要將你所需配置的濃度,pH值,以及配制的體積在網(wǎng)站上相應(yīng)的位置輸入或選定,即可計算出配制該溶液所需各組分的重量或體積,然后稱取相應(yīng)重量或體積的組分即可配制出您所需的緩沖液。
該網(wǎng)上工具包括以下內(nèi)容:
1) 配制磷酸鹽緩沖液
由一定量的Na2HPO4和NaH2PO4混合而得。
2) 配制檸檬酸(鹽)緩沖液
由Citric Acid(檸檬酸)和Trisodium Citrate(檸檬酸鈉)混合而得。
3) 配制醋酸溶液
在水中加入一定體積的醋酸而得。
4) 配制Tris緩沖液
由一定量的Tris HCl(Tris酸)和Tris Base(Tris堿)混合而得。
5) 重量與摩爾數(shù)轉(zhuǎn)換工具
已知一蛋白的分子量(kDa),可由重量推算出摩爾數(shù)和分子數(shù),以及在一定體積內(nèi)摩爾濃度。相反,也可由一個蛋白的摩爾數(shù)推算出重量和分子數(shù),以及由摩爾濃度推算出所含的蛋白質(zhì)量。
附:這些緩沖液在溶解PeproTech公司重組細胞因子和蛋白中的應(yīng)用舉例
1) 磷酸鹽緩沖液
1 x PBS用于溶解100-19 Human KGF 和100-52 Human FGF-23等。
2) 檸檬酸(鹽)緩沖液
5mM檸檬酸鈉(pH 8.0)用于溶解100-17A Human FGF-acidic, 10mM檸檬酸(pH 3.0)用于溶解100-21 Human TGF-b1等。
3) 醋酸溶液
10mM醋酸用于溶解120-10 Human Noggin和120-20 Human WISP-3等。
4) Tris緩沖液
5mM Tris(pH 7.6)用于溶解100-18B Human FGF-basic,10mM Tri(pH 8.0)用于溶解100-25 Human FGF-8。
關(guān)于PeproTech公司重組細胞因子和蛋白溶解的具體方法和注意事項請見:http://www.bdliyuan.com/showarticle.asp?ID=453068978
PeproTech公司簡介:
PeproTech Inc. 創(chuàng)立于1988年,始終致力于為生命科學(xué)研究開發(fā)重組蛋白及相關(guān)產(chǎn)品,如今已成為能提供多種高質(zhì)量細胞因子和重組蛋白,相應(yīng)的單克隆、多克隆和生物素標記抗體,以及ELISA試劑盒的世界領(lǐng)導(dǎo)者。PeproTech Inc.的產(chǎn)品涵蓋免疫調(diào)節(jié)蛋白、白介素、集落刺激因子、生長因子、化學(xué)趨化因子、干擾素、脂聯(lián)素、成纖維生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子、腫瘤壞死因子、神經(jīng)營養(yǎng)素和防御素等諸多生命科學(xué)研究領(lǐng)域中重要的生物活性分子。
為跟蹤當今科研發(fā)展、滿足日益增長的需求,PeproTech Inc.研制出無動物成分的重組蛋白(animal-free recombinant proteins)。這些蛋白是利用專有的無動物成分生產(chǎn)設(shè)施,在嚴格的無動物成分條件下生產(chǎn)出來,因此痕量的動物源性污染引發(fā)潛在問題的可能性被降至最低,從而完全達到臨床前研究和細胞治療用標準。此外,PeproTech Inc.最新還開發(fā)出無動物成分的培養(yǎng)基添加物試劑盒(animal-free Media Supplement Kits)。這些試劑盒經(jīng)改良設(shè)計,其中的無血清組分對多種哺乳動物細胞的生長有更好的維持能力。
PeproTech Inc.的產(chǎn)品自2000年進入中國市場以來,以其優(yōu)良的品質(zhì)和合理的價格迅速得到國內(nèi)各重點研究和實驗機構(gòu)的認可和青睞。鑒于中國經(jīng)濟發(fā)展的良好態(tài)勢和中國生物醫(yī)藥研發(fā)投入的巨額增長,PeproTech Inc.于2009年10月在中國蘇州設(shè)立代表機構(gòu),意為中國的廣大用戶提供更好的支持和服務(wù),并助中國的科研和產(chǎn)業(yè)開發(fā)一臂之力。
PeproTech China (派普泰克中國代表處) 是由美國PeproTech Inc.亞洲分公司在中國設(shè)立的外資常駐代表機構(gòu),負責(zé)對細胞因子及相關(guān)產(chǎn)品(包括抗體和ELISA試劑盒等)進行技術(shù)支持和市場推廣。