做免疫學(xué)特別是腫瘤學(xué)實驗，總免不了要測淋巴細(xì)胞或其他細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺傷，國外最常用的是Cr51放射實驗，但這個方法在國內(nèi)的不少地方都不能做，而MTT這個方法又太老，而且也不準(zhǔn)確，那么替代方法就用流式細(xì)胞術(shù)，又方便，又準(zhǔn)確。

 

具體參照如下：
1、計數(shù)靶細(xì)胞，并加入CFSE，使CFSE終濃度達(dá)到2uM,37度30分鐘。
2、拿出后，1000rpm,5min,可隱約看到細(xì)胞染成黃色，PBS洗三次
3、與效應(yīng)細(xì)胞混培，作用4-6小時。
4、將細(xì)胞混合液消化取出，洗二次，PI工作液5ul，避光30分鐘后上流式
5、CFSE，PI雙陽性的細(xì)胞為被殺傷的靶細(xì)胞，除以靶細(xì)胞總數(shù)，即為殺傷率。

注意事項：
1、CFSE及PI的濃度必須注意，寧低勿高，個人感覺，如果標(biāo)高的話，在4度放一晚好像會好一些
2、必須設(shè)全陰，CFSE單標(biāo)，PI單標(biāo)，CFSE＋PI雙標(biāo)并同步化的靶細(xì)胞的參照.
3、作用時間不能太長，不要超過8個小時。

 

你可能感興趣的生物試劑：

腫瘤/凋亡研究相關(guān)抗體
人、大小鼠等Elisa檢測試劑盒
生長因子
趨化因子
蛋白酶
神經(jīng)營養(yǎng)素