Human Stem Cell Kit——用于人干細胞轉(zhuǎn)染
 

　　產(chǎn)品介紹

　　在做干細胞轉(zhuǎn)染實驗時，需要先使用Human Stem Cell Nucleofector® Starter Kit [Cat. No. VPH-5002]以確定最適工作程序和Nucleofector® Solution(Solution1或Solution2)。

　　Human Stem Cell Kit 1和Human Stem Cell Kit 2適用于Nucleofector™ IIs/2b轉(zhuǎn)染儀，這是一種單孔細胞核轉(zhuǎn)染儀，支持單孔電轉(zhuǎn)杯的轉(zhuǎn)染平臺，適用于難轉(zhuǎn)染細胞系和原代細胞的高效轉(zhuǎn)染。 兩個試劑盒的區(qū)別只是含有的Nucleofector® Solution不同。試劑盒內(nèi)除含有特異的核轉(zhuǎn)染液(Nucleofector™溶液)，另外含有pmaxGFP™對照載體。

　　Lonza公司有50多種原代細胞轉(zhuǎn)染試劑盒。

　　試劑盒組分

　　1. 細胞特異性核轉(zhuǎn)染液

　　2. 添加劑

　　3. 一次性吸管(與單孔電轉(zhuǎn)杯配套)

　　4 .pmaxGFP™ 陽性質(zhì)粒

　　5. 單孔電轉(zhuǎn)杯

　　試劑盒優(yōu)點

　　1)轉(zhuǎn)染效率高達95%;

　　2)細胞活力高達98%;

　　3)需要更少的DNA和細胞;

　　4)避免了繁瑣的操作

　　已經(jīng)驗證過的細胞為：H1, H9, H14, HS306

　　延伸閱讀——原位轉(zhuǎn)染

　　“原位核轉(zhuǎn)染技術(shù)”突破了傳統(tǒng)電穿孔技術(shù)只能在細胞懸液中轉(zhuǎn)染的缺陷，實現(xiàn)了貼壁細胞在培養(yǎng)的不同階段中直接進行轉(zhuǎn)染的核轉(zhuǎn)染。原位轉(zhuǎn)染技術(shù)實現(xiàn)了生理狀態(tài)下(貼壁培養(yǎng)過程中)的轉(zhuǎn)染，如Basic Neuron Nucleofector® AD 轉(zhuǎn)染試劑盒。

　　2010年，Lonza推出了4D系統(tǒng)，其中利用X unit的16孔電轉(zhuǎn)板條，推出了第一個原位核轉(zhuǎn)染試劑盒;

　　2010年，Lonza推出了適用于96孔shuttle系統(tǒng)的新原位轉(zhuǎn)染試劑盒——96孔電轉(zhuǎn)板條。

　　2011年，Lonza推出了Y unit，可以直接在24孔細胞培養(yǎng)板中進行原位核轉(zhuǎn)染

　　優(yōu)勢：

　　– 可在神經(jīng)元貼壁生長的任何階段進行原位核轉(zhuǎn)染或多次進行原位核轉(zhuǎn)染

　　– 原位轉(zhuǎn)染前、中、后，神經(jīng)元都培養(yǎng)在24孔細胞培養(yǎng)板中，維持貼壁生長的生理狀態(tài)

　　– 唯一轉(zhuǎn)染效率最高可達70%的非病毒轉(zhuǎn)染方法

　　– 整個過程維持了細胞功能

　　– 適用于共聚焦顯微鏡下觀察和分析