Basic Fibroblasts Nucleofector® Kit——用于成纖維細胞轉染
 

　　產品介紹

　　Basic Fibroblasts Nucleofector® Kit 適用于Nucleofector™ IIs/2b轉染儀，這是一種單孔細胞核轉染儀，支持單孔電轉杯的轉染平臺，適用于難轉染細胞系和原代細胞的高效轉染。

　　Basic Fibroblasts Nucleofector® Kit(成纖維細胞轉染試劑盒)用于哺乳動物不同器官成纖維組織來源的細胞，可用來優(yōu)化轉染條件。試劑盒有專門的操作手冊，試劑盒內除含有特異的核轉染液(Nucleofector™溶液)，另外含有pmaxGFP™對照載體。轉染效率最高達到90%，細胞成活率98%。

　　Lonza公司有50多種原代細胞轉染試劑盒。

　　試劑盒組分(25 Test)

　　1. 細胞特異性核轉染液(2.25ml)

　　2. 添加劑(0.5ml)

　　3. 一次性吸管(與單孔電轉杯配套)(25個)

　　4 .pmaxGFP™ 陽性質粒(30μg)

　　5. 單孔電轉杯(100μl)(25個)

　　*所有組分可儲存在4℃，長期保存時，陽性質粒保存在-20℃。

　　Nucleofector 細胞核轉染技術操作步驟(詳細Protocol請登錄Lonza官方網站查閱)

　　整個操作過程只需四步，非常簡單、高效。

　　第1步：處理細胞，精確計數

　　第2步：混合DNA、轉染液，重懸細胞，加入轉染杯

　　第3步：將轉染杯放入轉染儀，按鍵選擇相應程序，按"start"鍵開始轉染，10秒鐘左右

　　第4步：取出細胞繼續(xù)培養(yǎng)。

　　延伸閱讀——原位轉染

　　“原位核轉染技術”突破了傳統(tǒng)電穿孔技術只能在細胞懸液中轉染的缺陷，實現了貼壁細胞在培養(yǎng)的不同階段中直接進行轉染的核轉染。原位轉染技術實現了生理狀態(tài)下(貼壁培養(yǎng)過程中)的轉染，如Basic Neuron Nucleofector® AD 轉染試劑盒。

　　2010年，Lonza推出了4D系統(tǒng)，其中利用X unit的16孔電轉板條，推出了第一個原位核轉染試劑盒;

　　2010年，Lonza推出了適用于96孔shuttle系統(tǒng)的新原位轉染試劑盒——96孔電轉板條。

　　2011年，Lonza推出了Y unit，可以直接在24孔細胞培養(yǎng)板中進行原位核轉染

　　優(yōu)勢：

　　– 可在神經元貼壁生長的任何階段進行原位核轉染或多次進行原位核轉染

　　– 原位轉染前、中、后，神經元都培養(yǎng)在24孔細胞培養(yǎng)板中，維持貼壁生長的生理狀態(tài)

　　– 唯一轉染效率最高可達70%的非病毒轉染方法

　　– 整個過程維持了細胞功能

　　– 適用于共聚焦顯微鏡下觀察和分析