銅檢測試劑盒(Cuprizone比色法)說明書
瀏覽次數:983 發(fā)布日期:2020-6-10
來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
銅檢測試劑盒(Cuprizone比色法)說明書
中文名稱:銅檢測試劑盒(Cuprizone比色法)
產品規(guī)格:50T
發(fā)貨周期:~3天
用途:
以雙環(huán)己酮草酰二腙法(又稱Cuprizone法)定量檢測血清、血漿銅含量
銅檢測試劑盒(Cuprizone比色法)操作規(guī)程
、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(完全培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
銅檢測試劑盒(Cuprizone比色法)注意事項:
、懸浮細胞用此法時必須經離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細胞數成比例,也受作用時間的影響,因此當樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色,需避光保存,長時間光照會導致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時,請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
注意事項:
以雙環(huán)己酮草酰二腙為底物,檢測620nm處測吸光度
儲存條件:4℃,避光,2個月