《小鼠鏟屎官養(yǎng)成記》，每周為大家介紹一個(gè)小鼠繁育與健康的知識(shí)點(diǎn)，帶大家成為一個(gè)合格的小鼠鏟屎官。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究的時(shí)候，小鼠的健康可能會(huì)影響到實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果的準(zhǔn)確性與可重復(fù)性！今天我們來(lái)接著學(xué)習(xí)健康檢測(cè)常用的采樣送檢方式。
 

opti-spot 血片

圖1. OPTI-SPOT血片

1.用途

可用于送國(guó)外檢測(cè)機(jī)構(gòu)，進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)病原體，例如MHV、MNV、仙臺(tái)病毒等。

2.opti-spot試紙條類型
☑ 標(biāo)準(zhǔn)版（見(jiàn)圖1下方）：比較常見(jiàn)，除了采血的紙片，還有紙質(zhì)外殼，比較完善；

☑ 簡(jiǎn)易版（見(jiàn)圖1上方）：只有采血的紙片。

3.使用方法
☑ 從小鼠尾部等取少量血液（血液量至少為25ul），滴入血片的圓圈處。第一滴血通常棄去不用，采集第二滴及以后的血。通常2-3滴血就足夠了；

☑ 圓圈內(nèi)部以及背面，必須全部被血液浸透；

☑ 允許有少量的血液滴在圓圈外，但是圓圈內(nèi)的血液量一定要足；

☑ 做好標(biāo)記，然后放置晾干，至少1個(gè)小時(shí)；

☑ 連同干燥劑一起裝入自封袋，以備運(yùn)輸。

4.注意事項(xiàng)
☑ 每個(gè)血片只能用于采集1只動(dòng)物；

☑ 血片圓圈內(nèi)的血液量要足；

☑ 晾干，并保持干燥。

糞便樣本
1.用途
☑ 可以用于糞便樣本的PCR法檢測(cè)病原體；

☑ 可以用于鏡檢腸道內(nèi)寄生蟲(chóng)；

☑ 可以采集后，轉(zhuǎn)入糞便運(yùn)輸培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)法檢測(cè)。

2.容器
滅菌的2mL或1.5mL的EP管。

3.采集方法
☑ 采集小鼠的糞便顆粒，盡可能新鮮；

☑ 每個(gè)樣本至少3顆糞便，最多不超過(guò)10顆糞便；

☑ 如果要轉(zhuǎn)入糞便運(yùn)輸培養(yǎng)基，糞便中加入少量滅菌水，混勻后用配套的拭子粘取糞便糊，插入糞便培養(yǎng)基中。

4.注意事項(xiàng)
☑ 如果要采集糞便用于培養(yǎng)法檢測(cè)，糞便顆粒要盡可能新鮮；

☑ 如果要采集糞便用PCR檢測(cè)，對(duì)糞便的新鮮程度要求會(huì)低一點(diǎn)；

☑ 要選擇濕潤(rùn)的糞便顆粒，不要選用干燥的糞便顆粒。

口腔拭子
 

圖2. 口腔拭子采樣材料

1.用途
☑ 用于口咽部分泌物的采集；

☑ 可以用于PCR法檢測(cè)，也可以轉(zhuǎn)入運(yùn)輸培養(yǎng)基用于培養(yǎng)法檢測(cè)；

2.采樣材料
☑ 口腔拭子（圖2右側(cè)）：國(guó)外比較常用，通常是無(wú)菌的，可以直接使用；

☑ 細(xì)紙軸棉花棒（圖2左側(cè)）：經(jīng)檢測(cè)機(jī)構(gòu)推薦，在國(guó)內(nèi)找到的替代品，需分裝經(jīng)高壓滅菌后使用。

3.采集方法
☑ 每個(gè)拭子只能采集一只小鼠的樣本；

☑ 保定小鼠，將拭子插入小鼠的口腔內(nèi)，可以輕輕旋轉(zhuǎn)，或停頓一下，采集口咽部的分泌物；

☑ 如果進(jìn)行病原菌的PCR檢測(cè)，可以直接把拭子剪斷后放到EP管或15mL離心管里。每管樣本可以包含不超過(guò)10根小鼠口腔拭子；

☑ 如果進(jìn)行病原菌的培養(yǎng)法檢測(cè)，需要插到運(yùn)輸培養(yǎng)基里。

4.注意事項(xiàng)
在采集時(shí)，如果要旋轉(zhuǎn)口腔拭子，動(dòng)作要輕柔。如果操作粗暴，可能會(huì)引起小鼠口腔內(nèi)出血。

皮毛拭子
 

圖3. 皮毛拭子采樣材料

1.用途

用于PCR方法檢測(cè)體外寄生蟲(chóng)。

2.采樣材料
☑ 皮毛拭子（見(jiàn)圖3右側(cè)）：國(guó)外比較常用，通常是無(wú)菌的，可以直接使用。和口腔拭子長(zhǎng)得很像，但是拭子頭部要粗一些；

☑ 粉頭拭子（見(jiàn)圖3左側(cè)）：經(jīng)檢測(cè)機(jī)構(gòu)推薦，在國(guó)內(nèi)找到的替代品。

3.采集方法
☑ 每個(gè)拭子只能采集一只小鼠的樣本；

☑ 單手固定小鼠尾部，另一手用拭子在小鼠的被毛上逆毛方向滾動(dòng)；

☑ 至少要包含頭面部、背部、腹部、肛周等處；

☑ 把拭子剪斷后放到EP管或15mL離心管里；

☑ 每管樣本可以包含不超過(guò)10根小鼠皮毛拭子。

4.注意事項(xiàng)
要逆著被毛的方向，滾動(dòng)采集。

皮毛膠帶玻片
1.用途
用于鏡檢體外寄生蟲(chóng)。

2.采樣材料
膠帶、載玻片。

3.采集方法
☑ 一人固定小鼠，另一人手持一段透明膠帶（推薦得力1.8cm寬）；

☑ 逆著被毛方向，在小鼠被毛上粘�。�

☑ 至少要包含頭面部、背部、腹部、肛周等處；

☑ 將膠帶貼在載玻片上，做好標(biāo)記；

☑ 每個(gè)膠帶能采集不超過(guò)3只小鼠；

4.注意事項(xiàng)
膠帶粘在玻片上時(shí)，要盡可能貼合，不要鼓起。

拔毛玻片
1.用途
國(guó)外檢測(cè)機(jī)構(gòu)比較常用，用于鏡檢體外寄生蟲(chóng)。

2.采樣材料
膠帶、鑷子、載玻片

3.采集方法
☑ 一手固定小鼠尾部，另一手持鑷子，在小鼠身上拔毛；

☑ 至少要包含頭面部、背部、腹部、肛周等四個(gè)部位的被毛；

☑ 將拔下的被毛粘在膠帶上，然后貼在載玻片上，做好標(biāo)記。

4.注意事項(xiàng)
☑ 膠帶粘在玻片上時(shí)，要盡可能貼合，不要鼓起；

☑ 至少4撮被毛。