發(fā)酵培養(yǎng)基的pH值，對微生物生長具有非常明顯的影響，也是影響發(fā)酵過程中各種酶活的重要因素。因此，pH的監(jiān)測與調(diào)節(jié)，于發(fā)酵過程而言十分重要。
 
發(fā)酵過程中通常是采用復(fù)合pH電極直接插入罐內(nèi)發(fā)酵液的方式對pH進(jìn)行實時監(jiān)測。而高壓高溫的滅菌操作和發(fā)酵液的理化性質(zhì)會對pH電極測量造成影響，所以正確的使用方法和日常的維護(hù)保養(yǎng)尤其關(guān)鍵。
 

1. 安裝使用前的準(zhǔn)備
① 打開包裝時，要仔細(xì)檢查電極的pH敏感膜玻璃、隔膜（素?zé)�陶瓷芯）和玻璃體是否存在機(jī)械損傷。
② 取下盛液套并用純水清洗電極頂部，然后用濕紙巾或者吸水紙輕輕擦干。注意不要摩擦pH敏感膜，以防增加響應(yīng)時間。
③ 將pH電極平緩移至垂直位置以防pH敏感膜玻璃球泡內(nèi)存有氣泡。如沒有充滿液體或存有氣泡，應(yīng)輕輕甩動電極使球泡內(nèi)充滿液體，直至沒有氣泡。
④ 電極使用前可先在酸性緩沖液（pH4.01）中浸泡數(shù)分鐘，用純水沖洗玻璃球泡部分，再用吸水紙輕輕將玻璃球泡部分的水吸干，再在中性緩沖液（pH6.86或7.00等）中浸泡數(shù)分鐘以活化電極，然后再開始校準(zhǔn)。

2. pH電極兩點校準(zhǔn)操作
將pH電極在標(biāo)準(zhǔn)緩沖液中浸泡10min，待測定數(shù)值穩(wěn)定1min左右后，再依次進(jìn)行pH電極的第一點標(biāo)定和第二點標(biāo)定。

② 連接電極，并用純水沖洗電極，沖洗后再用吸水紙輕輕吸干探頭上的水。
③ 將玻璃球泡部分浸沒在第一種緩沖液（例pH=4.01）內(nèi)（隔膜應(yīng)完全浸沒在緩沖液中），待標(biāo)準(zhǔn)值穩(wěn)定后（30秒至60秒）點擊第一點確認(rèn)，第一點標(biāo)定結(jié)束。

④ 將電極從第一種緩沖液中取出，并用純水沖洗電極，沖洗后再用吸水紙輕輕吸干探頭上的水。
⑤ 將玻璃球泡部分浸沒在第二種緩沖液（例pH=9.18）內(nèi)（隔膜應(yīng)完全浸沒在緩沖液中），待標(biāo)準(zhǔn)值穩(wěn)定后（30秒至60秒）點擊第二點確認(rèn)，第二點標(biāo)定結(jié)束，等待使用（建議時間不要太長）。

3. 電極校準(zhǔn)時的注意事項
① 校準(zhǔn)時請注意采用新鮮的緩沖液；
② 電極在緩沖液中放置1min后再進(jìn)行后續(xù)操作；
③ 沖洗電極后只能用柔軟的吸水紙吸干水分，切勿摩擦pH敏感膜；
④ 電極的校準(zhǔn)周期根據(jù)不同的使用環(huán)境和精度要求而定，請在保證精度的前提下確定適當(dāng)?shù)男��?zhǔn)周期；
⑤ 由于pH電極探頭及其易碎，所以在使用過程中切勿磕碰。
 

所謂溫度補償，是將電極在標(biāo)定溫度下（一般為25℃）得到的斜率按能斯特公式換算到當(dāng)前溫度下的斜率，從而得到當(dāng)前溫度下正確的pH值。主要用來修正由于標(biāo)準(zhǔn)緩沖液等標(biāo)樣在標(biāo)定時的溫度與實際樣品溶液溫度不同引起的偏差。
 

HOLVES系列產(chǎn)品可以通過設(shè)備的溫度電極測量到當(dāng)前液體溫度，然后通過自身軟件計算后，顯示經(jīng)溫度補償后的pH值。所以，無論是校準(zhǔn)還是性能測試，都需要確保設(shè)備的溫度電極是工作狀態(tài)。
 

 

 

HOLVES系列發(fā)酵罐可直接讀出電極所測液體的電壓信號，并且如果電極出現(xiàn)問題或者安裝、使用錯誤，pH校準(zhǔn)界面下方會彈出電極不可用紅色提示字樣，方便客戶了解電極的使用狀態(tài)。
 

5. 電極的清洗
① 一般性污染用水、0.1mol/L NaOH或0.1mol/L HCl清洗電極數(shù)分鐘。
② 油脂或有機(jī)物污染用丙酮或乙醇清洗電極數(shù)秒鐘。
③ 硫化物污染（隔膜發(fā)黑）用硫脲/HCl處理，將玻璃球泡部分浸泡在溶液中（隔膜應(yīng)沒入溶液中），直到隔膜無色（至少1小時），然后浸泡在3mol/L的KCl中至少12小時，完全沖洗并重新校準(zhǔn)后可使用。
④ 蛋白質(zhì)污染（隔膜發(fā)黃）用胃液素/HCl處理，將玻璃球泡部分放入溶液中，確保隔膜浸沒在溶液中（至少1小時），然后用蒸餾水沖洗、重新校準(zhǔn)。

 

 

6. 電極的保存
① 每個生產(chǎn)周期結(jié)束后，使用去離子水認(rèn)真沖洗電極頭與隔膜，絕不可使這些零件上的測量溶液變干。
② 電極不可放在蒸餾水中保存，較長時間不用時，應(yīng)當(dāng)將其連同電極頭與隔膜充分浸泡在3mol/L的KCI或9816/ViscolytTM電解液內(nèi)。
③ 電極不能長期干放，不能在表面附有干燥介質(zhì)時貯存電極。如果因錯誤導(dǎo)致電極被干燥存放數(shù)日，應(yīng)在使用之前將其浸泡在正常存儲電解液內(nèi)若干小時。
④ 應(yīng)時常檢查連接器是否出現(xiàn)受潮跡象。如有必要,用去離子水或酒精徹底清洗，然后小心擦干。

 

希望以上的內(nèi)容能對您的發(fā)酵提供一點幫助，如有問題可與我們聯(lián)系，HOLVES將竭誠為您服務(wù)！

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