這一篇，我們?yōu)榇蠹規(guī)��?lái)更深入的核酸酶使用技巧！和大家一起探討如何在實(shí)際使用中更好地調(diào)整我們的實(shí)驗(yàn)方法，讓核酸酶發(fā)揮最大的作用！本篇主要在尿素變性條件使用、低溫環(huán)境以及核酸酶滅活與去除等幾個(gè)問(wèn)題上做出解答。
 
典型應(yīng)用：
新冠滅活疫苗生產(chǎn)過(guò)程中宿主DNA的去除
傳統(tǒng)疫苗工藝純化過(guò)程中去除宿主核酸
細(xì)胞或基因治療病毒載體制備流程宿主核酸的去除
重組蛋白純化或組織細(xì)胞樣品蛋白提取時(shí)去除核酸污染
與細(xì)胞或細(xì)菌裂解液配合使用，去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白產(chǎn)量
減少存放的外周血單細(xì)胞（PBMC）的結(jié)塊現(xiàn)象）
 
讓我們來(lái)看看Pannarse全能核酸酶在使用上更深入的一些小介紹吧！
 
1. 當(dāng)?shù)鞍兹芙庑圆?/strong>需要變性，變性環(huán)境對(duì)核酸酶有影響嗎？
常見(jiàn)的變性條件下一般會(huì)使用高濃度尿素。Pannarase核酸酶在尿素濃度6M時(shí)，隨著時(shí)間延長(zhǎng)活性會(huì)逐漸減少。在7M尿素濃度下，核酸酶15min后出現(xiàn)變性失活，但在酶失活前多數(shù)核酸已降解，可通過(guò)提高核酸酶濃度補(bǔ)償高濃度尿素影響。
 
 
2. 當(dāng)反應(yīng)溫度低于37℃時(shí)，如何保證核酸酶消化效果？
體系固定的情況下，核酸酶消化效果取決于酶用量、反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間。當(dāng)反應(yīng)溫度較低時(shí)，為避免過(guò)多的核酸酶引起的殘留問(wèn)題，更加推薦延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間來(lái)保證消化效果。
 
怎樣滅活Pannarase核酸酶？如何去除？
采用EDTA螯合金屬離子會(huì)可逆地抑制核酸酶活性，極端條件會(huì)造成不可逆失活，例如100mM NaOH，70℃處理30min等。核酸酶可采用陰離子交換柱從目的產(chǎn)物中分離出去。
 
關(guān)于常用反應(yīng)液和減少用量 ，你應(yīng)該知道~~
常用生物緩沖液，如TBS、MOPS（pH6-8）等。如需減少用量，可酌情提高反應(yīng)溫度或延長(zhǎng)時(shí)間。
 
以上是我們關(guān)于核酸酶使用的更深一步的技巧介紹，后續(xù)我們會(huì)持續(xù)更新為您的實(shí)驗(yàn)提供更多參考，敬請(qǐng)關(guān)注！
 
相關(guān)產(chǎn)品信息：
Pannarase全能核酸酶五大特點(diǎn)：
1. 杰出的比酶活，更高效的核酸降解能力
2. 規(guī)范的液相標(biāo)準(zhǔn)品定量，出色的質(zhì)譜均一性認(rèn)證
3. 嚴(yán)格的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，確保單位酶活的準(zhǔn)確性以及批次間穩(wěn)定性
4. 無(wú)動(dòng)物源性物料
5. 先進(jìn)的生產(chǎn)工藝，非傳統(tǒng)His標(biāo)簽純化，排除引入金屬離子風(fēng)險(xiǎn)