細(xì) 胞 基 本 信 息

▲LNCaP clone FGC細(xì)胞正常生長形態(tài)照片

細(xì)胞名稱：LNCaP clone FGC(人前列腺癌細(xì)胞) 

細(xì)胞別稱：LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCAPCLONEFGC; LNCaP-ATCC

細(xì)胞貨號：SNL-356 

培養(yǎng)條件：1640+10% FBS+1% P/S 

培養(yǎng)環(huán)境：空氣，95%；二氧化碳 (CO2)，5%
 

細(xì)胞簡介：人前列腺癌細(xì)胞LNCaP clone FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結(jié)針刺活檢中分離，該患者經(jīng)確診為前列腺癌轉(zhuǎn)移。LNCaP clone FGC細(xì)胞對5-α-二氫睪酮(生長調(diào)節(jié)子和酸性磷酸脂酶產(chǎn)物)有響應(yīng)。LNCaP clone FGC細(xì)胞并不形成一致的單層，而是形成集落，在傳代時(shí)可以反復(fù)吹吸分散。LNCaP clone FGC細(xì)胞僅僅輕輕地吸附在基底上，不形成匯合，很快使培養(yǎng)基變酸。LNCaP clone FGC細(xì)胞生長極其緩慢，傳代后48小時(shí)內(nèi)不應(yīng)擾動(dòng)。當(dāng)培養(yǎng)瓶包裝運(yùn)輸后，多數(shù)LNCaP clone FGC細(xì)胞從培養(yǎng)瓶底分離，懸浮在培養(yǎng)基中。
 

操 作 實(shí) 例
 

客戶提問：
LNCaP clone FGC細(xì)胞收到平衡一晚上，成團(tuán)嚴(yán)重基本沒什么貼壁的怎么處理？
 

細(xì)胞在運(yùn)輸過程中因溫差，震蕩，碰撞等原因可能會(huì)出現(xiàn)漂浮成團(tuán)的現(xiàn)象，不用著急，T25表面消毒放入培養(yǎng)箱中平衡2-4h后按以下步驟操作即可恢復(fù)貼壁。

① 收集所有培養(yǎng)基及漂浮細(xì)胞到無菌50ml離心管，1000rpm，5min離心收集細(xì)胞沉淀。

② 取培養(yǎng)基上清到4℃保存，用于培養(yǎng)細(xì)胞，以平穩(wěn)過度到客戶自己的培養(yǎng)基。在原50ml離心管中加入5mlPBS重懸細(xì)胞沉淀，盡量吹散后1000rpm，5min離心，棄上清。

③ 加入1ml胰酶輕輕震蕩混勻，勿直接吹打細(xì)胞，然后放入培養(yǎng)箱消化2-3min，消化完成后用移液器輕輕吹打幾下，吹散細(xì)胞后立刻加5ml完培終止消化。1000rpm，5min離心，棄上清。

④ 加入1ml完培重懸細(xì)胞接種到新培養(yǎng)瓶中。T25加10-12ml培養(yǎng)基培養(yǎng)，通常2天左右換液一次，若培養(yǎng)基變黃及時(shí)換液，以維持一個(gè)相對穩(wěn)定的培養(yǎng)條件，有利于細(xì)胞活正常生長。
 

注意：

原T25剩余貼壁細(xì)胞密度大于70%，可以正常消化傳代；貼壁細(xì)胞較少可以加培養(yǎng)基正常培養(yǎng)至70%密度以上消化傳代；若幾乎沒有細(xì)胞則可以丟棄。

若出現(xiàn)傳代后次日貼壁較少的情況，可以收集培養(yǎng)基及漂浮細(xì)胞到離心管，離心收集未貼壁細(xì)胞，然后加新培養(yǎng)基盡量重懸吹散后接種回原培養(yǎng)瓶讓細(xì)胞繼續(xù)貼壁，注意小心操作，避免將已貼壁細(xì)胞吹下。

由于貼壁較弱細(xì)胞消化時(shí)間本身較短，必須控制消化時(shí)間和吹打力度，避免細(xì)胞消化或吹打死亡過多導(dǎo)致無法正常貼壁生長。
 

1.培養(yǎng)基營養(yǎng)不足以及pH值過低時(shí)會(huì)使細(xì)胞活力大幅度下降，建議加足量培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，特別注意培養(yǎng)基變黃后要及時(shí)換液；

2.換液時(shí)注意不要直接沖擊到細(xì)胞表面以及過冷的試劑處理細(xì)胞，避免細(xì)胞回縮脫落；

3.細(xì)胞不要長時(shí)間高密度培養(yǎng)，70-80%密度左右即可傳代，以維持細(xì)胞有較好的活性；

4.不要將細(xì)胞放置室溫過久或經(jīng)常挪動(dòng)細(xì)胞，盡量讓細(xì)胞靜養(yǎng)。

5.細(xì)胞貼壁較弱，培養(yǎng)過程細(xì)胞通常呈聚集放射狀生長，可能會(huì)有部分細(xì)胞漂浮生長；

6.建議使用TC表面處理的高貼培養(yǎng)瓶或明膠、多聚賴氨酸等包被的培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞，有利于細(xì)胞貼壁生長。

【SNL-356】LNCaP clone FGC(人前列腺癌細(xì)胞)

【SNLM-356】人前列腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基

公 司 簡 介

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武漢尚恩生物技術(shù)有限公司坐落于武漢東湖高新區(qū)光谷生物城，專注于細(xì)胞及系列產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和服務(wù)，公司建有標(biāo)準(zhǔn)化GMP實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物房，已整體通過ISO 9001:2015質(zhì)量管理體系認(rèn)證，獲得高新技術(shù)企業(yè)、3551人才、瞪羚企業(yè)、科技小巨人等多項(xiàng)榮譽(yù)。  

公司主要研發(fā)生產(chǎn)細(xì)胞系、原代細(xì)胞、胎牛血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基、輔助試劑等系列產(chǎn)品，提供細(xì)胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購；細(xì)胞庫凍存細(xì)胞系500余種，同時(shí)通過不間斷引種細(xì)胞擴(kuò)大豐富細(xì)胞種類；公司還提供人源細(xì)胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務(wù)等。  

公司細(xì)胞業(yè)務(wù)覆蓋國內(nèi)各大高校生物實(shí)驗(yàn)室、生物研究機(jī)構(gòu)及一些生物科研、診斷、制藥公司，不斷為廣大科研工作者提供最優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)！尚恩生物—您專業(yè)的細(xì)胞供應(yīng)商！