慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一種常見(jiàn)、多發(fā)、高致殘率和高致死率慢性呼吸系統(tǒng)疾病，它的發(fā)生與肺部對(duì)有害氣體或有害顆粒的異常炎癥反應(yīng)有關(guān)。COPD即將成為全球第三大死亡原因，疾病特征是慢性氣道炎癥，黏液高分泌、氣道重塑，和肺氣腫，隨著病情反復(fù)發(fā)作、急性加重，導(dǎo)致肺功能逐漸下降呼吸困難。

因此，建立理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型是研究COPD發(fā)病機(jī)制、疾病防治、新藥開(kāi)發(fā)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

杭州赫貝致力于動(dòng)物疾病模型研究與開(kāi)發(fā)，在COPD模型的臨床前研究上有豐富的經(jīng)驗(yàn)。本文將對(duì)COPD模型進(jìn)行詳細(xì)的介紹。

 

慢性阻塞性肺疾病(COPD)動(dòng)物疾病模型

 

造模方法選擇：

 

COPD穩(wěn)定期動(dòng)物模型

常采用煙熏法或煙熏+LPS氣管內(nèi)注射法。煙熏+LPS法較單獨(dú)煙熏法造模周期更短，但死亡率較高。

 

COPD急性期動(dòng)物模型

采用煙熏+LPS建立COPD穩(wěn)定期大鼠模型基礎(chǔ)上感染金黃色葡萄球菌或肺炎桿菌滴鼻感染。

 

關(guān)鍵點(diǎn)

 

1.煙熏法保證每天2次，每次在自制染毒箱(90×60×50cm3)持續(xù)吸入新鮮的香煙霧1h，使密閉箱煙霧濃度約為100-120 mg/m3(平均每只動(dòng)物吸煙量1支/天/次)，造模周期60d左右。

2.LPS氣管注射在第1天、第14天進(jìn)行，暴露喉頭，向大鼠氣管內(nèi)注入200 μg/kg(200 μg/ml溶于生理鹽水中) LPS，完畢后將大鼠直立旋轉(zhuǎn)10-20s，使LPS均勻分布于肺部。

3.細(xì)菌滴鼻感染需要高濃度菌液(2×10^9cfu/mL)反復(fù)多次滴鼻。急性期過(guò)后會(huì)逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)榉�(wěn)定期COPD。

 

模型評(píng)價(jià)

 

一般情況對(duì)照組大鼠無(wú)死亡，毛發(fā)光澤，呼吸均勻，活動(dòng)正常。

模型組大鼠相繼出現(xiàn)流鼻涕、打噴嚏、咳嗽、眼角有血樣分泌物、呼吸有啰音、毛色枯黃無(wú)光澤等現(xiàn)象。部分有脫毛現(xiàn)象，躁動(dòng)，倦怠蜷縮，腹部脹大，出現(xiàn)點(diǎn)頭運(yùn)動(dòng)，甚者張口呼吸等明顯癥狀。

 

模型制備

 

氣道滴注LPS

煙熏

肺組織

肺功能評(píng)價(jià)

 

使用實(shí)驗(yàn)小動(dòng)物肺功能測(cè)定儀測(cè)定肺功能;主要指標(biāo)有吸氣持續(xù)時(shí)間(TI)和呼氣持續(xù)時(shí)間(TE)、最大吸氣流量(PIF)和最大呼氣流量(PEF)、潮吸量(TV)和呼氣量(EV)、松馳時(shí)間(RT)、每分鐘吸氣量(MV)、呼吸頻率(F)、吸氣末間隙(EIP) 和呼氣末間隙(EEP)、支氣管收縮參數(shù)(PENH)、50%呼氣流速(EF50)。

病理評(píng)價(jià)

 

肺間質(zhì)可見(jiàn)彌漫性肺泡壁增厚、出血，肺小動(dòng)脈壁增厚，支氣管黏膜下可見(jiàn)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，以單核細(xì)胞為主并可見(jiàn)少量中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞;