胎牛血清的作用及選擇標準

瀏覽次數(shù)：1399　發(fā)布日期：2023-11-28　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責任自負

你的胎牛血清靠譜嗎？

自從第一個在青蛙淋巴液中維持青蛙神經(jīng)纖維的體外細胞培養(yǎng)實驗以來，科學家們一直在尋找最佳體外細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分。

多年來，陸續(xù)研發(fā)出動物源性培養(yǎng)基和人工培養(yǎng)基。人工培養(yǎng)基例如Eagles培養(yǎng)基及其改良的Eagles培養(yǎng)基(MEM) 和Dulbecco的MEM (DMEM)，以及Ham F10、F11和 F12。然而并非所有細胞都在此類人工培養(yǎng)基中進行繁殖。

1958年Theodore T. Puck首次引入了胎牛血清(FBS/FCS)來刺激細胞和組織在體外增殖，驚喜地觀察到細胞在含有胎牛血清的培養(yǎng)基中，可以維持更長時間的活性，同時生長狀態(tài)也更佳。自此，體外培養(yǎng)迎來新世代。

什么是血清

血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后，分離出的淡黃色透明液體。

胎牛血清（FBS）指還在母牛身體里的小牛，通常5-8個月胎齡，之后對未發(fā)育完全的胎牛的心臟穿刺取血，完成采血的工作以后便再通過一系列的工藝處理獲得胎牛血清。

胎牛血清與新生牛血清（NBS）所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同，胎牛血清含有胚胎發(fā)育所必需的生長因子。

牛屬于哺乳動物，母牛從受精到生產(chǎn)一般要十個月左右的時間，部分生長因子到達8月后開始逐漸消失，所以胎牛血里的生長因子適合牛體內(nèi)各種細胞生長。此外，胎牛血清的免疫球蛋白含量要遠遠低于新生牛血清，培養(yǎng)細胞的效果會更好。

研究表明胎牛血清中含有激素、維生素、轉(zhuǎn)運蛋白、微量元素、擴散因子和生長因子等細胞體外增殖和維持的必需成分，現(xiàn)已被廣泛用作研究、生物技術(shù)和制藥中人類和動物（包括昆蟲）細胞培養(yǎng)基的通用補充劑。

血清的作用

Ø 提供細胞生長基本的營養(yǎng)物質(zhì)，如氨基酸、維生素、脂類物質(zhì)、無機物、核酸衍生物等。

Ø 提供可識別金屬、激素、維生素和脂質(zhì)的結(jié)合蛋白，通過與上述物質(zhì)的結(jié)合，攜帶重要地低分子量物質(zhì)，在細胞代謝過程中起著重要作用。

Ø 提供貼壁細胞固著于適當?shù)母街嫠璧?strong>貼壁因子和擴展因子，如表皮生長因子、成纖維細胞生長因子等。

Ø 提供促接觸和伸展因子，使細胞貼壁免受機械損傷。

Ø 提供蛋白酶抑制劑，中和細胞釋放的蛋白酶，使細胞免受蛋白酶的損傷。

Ø 影響培養(yǎng)系統(tǒng)中的某些物理特性如：剪切力、黏度、滲透壓和PH等。如血清具有一定的粘度，可以保護細胞免受機械損傷。

盡管使用廣泛，但胎牛血清在細胞培養(yǎng)中面臨著諸多問題和風險。

來自瑞士弗里堡大學 Adolphe Merkle 研究所 (AMI) 的生物納米材料組和英國斯旺西大學醫(yī)學院的體外毒理學組 (IVTG) 兩個不同的實驗室進行了體外實驗，這些實驗應(yīng)用了相同的實驗程序并使用了來自同一供應(yīng)商的A549細胞和胎牛血清，他們得到的結(jié)果大不相同。進一步分析表明，細胞反應(yīng)差異的一個原因是細胞培養(yǎng)基中添加了來自不同批次的胎牛血清。

批次間的較大差異使得實驗的可重復性降低。