MTT法：又稱 MTT 比色法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性 MTT 還原為不溶于水的藍紫色結(jié)晶甲臜 (Formazan) 并沉積在細胞中，但死細胞無此功能，后經(jīng) DMSO 溶解，于 490 nm 處測定吸光值便可間接反應(yīng)細胞活力。但該方法除去操作步驟耗時以外，生成的 Formazan 是不溶于水的，需經(jīng) DMSO 溶解后才能檢測，增加了工作量的同時仍不能保證測定結(jié)果的準確性，且該溶劑對人體具有明顯毒性。
 

CCK8法：相較于 MTT，無論是操作步驟還是檢測時間都優(yōu)化了很多。CCK8 是一種基于 WST-8 而廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度、無放射性的比色檢測方法。但在實驗時，一直有個問題讓人很困擾——“細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺”，但這個顏色深淺的標準我 “標” 不出來怎么辦？痛點！痛點！痛點！
 

CTG 發(fā)光法：基于高靈敏度生物發(fā)光檢測技術(shù)，通過對三磷酸腺苷 (ATP) 進行定量以測定培養(yǎng)物中活細胞數(shù)目及細胞活力。該實驗方法可用三個字簡單概括 “快、準、狠”，比 MTT 的處理速度快近 20 倍，節(jié)省時間近 4 小時。CTG 特有的均質(zhì)檢測法即 “加樣-混樣-檢測”，使用時，只需將本試劑等體積添加至培養(yǎng)細胞中即可進行檢測。不用感慨，細胞活力檢測為什么不能如此簡單？

二， MTT、CCK8 與 CTG 法特點比較
 

三，CTG適用于哪些實驗？

首先，來了解實驗 CTG 發(fā)光法的測定原理：ATP 作為細胞新陳代謝的一個重要指標，與活細胞數(shù)目呈良好的線性關(guān)系，是細胞活力檢測的重要標志性分子。

ATP 生物發(fā)光的原理為：熒光素酶以熒光素、ATP 和 O2 為底物，在 Mg2+ 存在時，可將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能；在熒光素酶催化的發(fā)光反應(yīng)中，ATP 在一定的濃度范圍內(nèi)，其濃度與發(fā)光強度呈線性關(guān)系，即在光信號與酶反應(yīng)體系中，發(fā)光值與 ATP 呈正比，ATP 與活細胞數(shù)成正比，CTG 發(fā)光法通過 ATP 含量來進行細胞計數(shù)或活力測定，且不受化合物自發(fā)熒光的影響 (圖 2)，是細胞增殖測定，細胞活力測定和細胞毒性高通量篩選分析的理想選擇。