相比全自動細胞計數(shù)儀，半自動細胞計數(shù)儀存在以下問題導致計數(shù)結果重復性和準確性要差：

1. 細胞樣品和臺盼藍的體積需要移液槍手動定量，而且混勻也是手動來完成，因此不可避免地產(chǎn)生人為操作誤差。

2.  從搖瓶培養(yǎng)的幾十毫升或生物反應器幾十到上百升的細胞樣品中，吸取20-30uL體積的樣品進行檢測，由于取樣量少，容易引起取樣代表性差，結果不準確的問題。

3. 儀器一般只拍1-3張照片，分析統(tǒng)計的細胞數(shù)量相對少，結果的代表性相對較差。

同時，染色后的細胞樣品通過移液槍加到計數(shù)板上，有時會操作不當產(chǎn)生氣泡，特別是細胞培養(yǎng)液中含有較多易產(chǎn)生氣泡的蛋白，這種問題更容易發(fā)生。另外，廢棄的細胞計數(shù)板還會產(chǎn)生二次固體污染，這些問題目前都沒有好的解決方法。
 

那有沒可能細胞的混懸和染色，以及細胞的計數(shù)和分析過程全部實現(xiàn)自動化，同時不用手動更換新的細胞計數(shù)板而自動做下一個樣品呢？答案是使用全自動細胞計數(shù)分析儀。

PART 02

如何快速鑒別全自動和半自動細胞計數(shù)儀？

結合細胞計數(shù)和活率分析的檢測過程，除了要放入待檢測的樣品外，全自動細胞計數(shù)儀可以讓儀器自動完成樣品的混懸、臺盼藍染色、細胞拍照和識別、測試結果的分析統(tǒng)計和顯示。

 

相比半自動細胞計數(shù)儀，全自動細胞計數(shù)儀有以下一些特點可供大家快速鑒別。

1. 自動混懸和臺盼藍染色

全自動細胞計數(shù)儀的一個顯著特點是能夠自動完成細胞的吹打混懸和臺盼藍染色。

 

要擁有這個特點，儀器必須具備下面兩個功能。

首先，儀器內部要有步進馬達，準確控制細胞樣品和臺盼藍等體積混合。

然后，儀器還要可以自動混勻染色，能將細胞樣品和臺盼藍進行有效地染色處理。

而這兩步操作，對于半自動細胞計數(shù)儀而言，還只能通過手動操作來完成。

2.自動管路清洗

全自動細胞計數(shù)儀內部有一個流通池，可用于流過的細胞拍照成像，所以就不需要細胞計數(shù)板這個耗材。當樣品檢測結束后，儀器需要自動對流通池進行清洗，并在清洗結束后將管路內液體切換到對細胞友好的磷酸緩沖液，等待下一個樣品的檢測。

所以，除了對細胞拍照的光路系統(tǒng)和用于數(shù)據(jù)控制的電子系統(tǒng)外，相比半自動細胞計數(shù)儀，全自動細胞計數(shù)儀還有一個清洗管路的液路系統(tǒng)，并通過八通閥的切換完成細胞的染色和管路清洗。因此，一般大家看到的全自動細胞計數(shù)儀體積會相對大一些。

全自動細胞計數(shù)儀檢測原理示意圖和結構組成

3. 高通量和不間斷檢測

全自動細胞計數(shù)儀的另一個特點是高通量和不間斷檢測。待測樣品可以先放到轉盤或96孔板上，根據(jù)軟件中設置好的分析條件，儀器會自動按要求分別對這些細胞樣品完成計數(shù)和活率分析。

Vi-CELL BLU細胞計數(shù)儀的兩種上樣模塊

以貝克曼庫爾特生命科學Vi-CELL BLU全自動細胞計數(shù)儀為例，使用轉盤一次可以放21個樣品，而使用孔板最多可以放96個樣品進行分析測試。若使用24位轉盤，在檢測過程中還可以實現(xiàn)不間斷上樣測試，即樣品測試過程中，還可以放入新的待測樣品。所以，在操作便捷性上，全自動細胞計數(shù)儀也是優(yōu)于半自動細胞計數(shù)儀。
 

總之，全自動細胞計數(shù)儀在細胞樣品混懸和染色方面避免了人為操作帶來的誤差，同時儀器能自動清潔管路和過夜清洗，而且可以高通量上樣和不間斷測試。因此，不管是細胞計數(shù)的重復性和準確性，還是儀器操作的便捷性上，全自動細胞計數(shù)儀都比半自動插板式細胞計數(shù)儀更有優(yōu)勢。

希望大家可以通過此文介紹的以上這些特點，在面對琳瑯滿目的細胞計數(shù)儀時，能夠快速有效地鑒別出細胞計數(shù)儀是“真”全自動還是“假”全自動。

除了儀器測試結果的重復性和準確性，對于生物制藥的質量控制和生產(chǎn)部門，儀器軟件的法規(guī)符合度也是一個很重要的點。所以，下一期的細胞計數(shù)儀知識分享，我們將為您提供法規(guī)符合度方面的內容介紹。