免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)人體的各種生理過程。因此,提高機體免疫力,增強免疫功能,對于預(yù)防疾病的發(fā)生,恢復(fù)健康至關(guān)重要;罨木奘杉毎芍苯踊蜷g接參與免疫系統(tǒng)的免疫反應(yīng),通過吞噬作用清除抗原異物、衰老細胞和細胞碎片,進而分泌活性氧、活性氮和促炎因子。
巨噬細胞(Macrophages)屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。小鼠巨噬細胞樣細胞系RAW264.7是醫(yī)學研究中最常用的小鼠巨噬細胞細胞系,RAW264.7細胞株是約30年前從生長在BAB/14小鼠體內(nèi)的腫瘤中獲得的,這是一種BALB/c IgH同源株,接種了Abelson小鼠白血病病毒(MuLV)。
巨噬細胞的形態(tài)會隨著細胞活性、功能、環(huán)境和藥物的改變而改變。例如,相關(guān)研究顯示一種低分子量肽(NJP)處理引起RAW264.7細胞形態(tài)學改變,胞體增大呈圓形和不規(guī)則形狀,偽足擴張,而正常對照組巨噬細胞呈圓形,形態(tài)正常。很多實驗者發(fā)現(xiàn)在RAW264.7細胞正常培養(yǎng)中,細胞也會出現(xiàn)多邊形和不規(guī)則形狀,并伴有許多偽足的生成,細胞貼壁能力超強。
據(jù)了解,實驗者甚至用0.25%的胰酶消化30min,結(jié)果細胞仍“無動于衷”。
經(jīng)過本公司技術(shù)員不斷探究,
總結(jié)出了關(guān)于RAW264.7細胞培養(yǎng)的若干注意事項,
希望可以幫到大家。
培養(yǎng)注意事項
1. 該細胞傳代時不需要用胰酶消化。傳代時,吸走部分培養(yǎng)液,留下少許培養(yǎng)液(如T25培養(yǎng)瓶留下7-8ml),用無菌細胞刮刮拭培養(yǎng)表面將細胞刮落,吹打后接種到新的裝有新鮮培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
2. 該株巨噬細胞形態(tài)上包含松散貼壁的紡錘形和圓形或者立方形的細胞。當細胞密度較大時,細胞會輕微脫落變圓或者許多細胞堆在一起,有些細胞甚至脫落漂浮,這些漂浮的細胞是存活的,在傳代時應(yīng)收集起來離心,細胞沉淀可以繼續(xù)培養(yǎng)。
3. 血清質(zhì)量差異可能引起細胞貼壁能力變化,應(yīng)選用高質(zhì)量的胎牛血清。
4. 培養(yǎng)條件、運輸、環(huán)境變化等因素會影響此細胞的狀態(tài),因此收到細胞后需要調(diào)整一段時間,請耐心培養(yǎng)。
5. 強烈推薦使用本公司對應(yīng)的培養(yǎng)基,減少細胞培養(yǎng)過程的變因。
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