來解析“身份證”之前,我們先來了解一下什么是基因工程小鼠。
基因工程小鼠,是指通過基因編輯技術手段,對小鼠基因組進行一定的人為修飾,由此產(chǎn)生具有特定表型或特征的小鼠;蚬こ绦∈笸ǔ?煞譃榛蚨c修飾小鼠(如:敲除、敲入、點突變等)和轉基因小鼠兩類。
基因定點修飾小鼠
這一類小鼠的名稱基本長這樣,下面我們將逐一解析這些組成部分。
1.品系背景
在單一的小鼠背景上完成的基因修飾,且在繁育過程中未引入其它品系,那么就可用品系全稱或者簡寫來表示。
表1 部分品系全名及其簡寫
這里特別提一下定點過表達的這類情況,目前Rosa26位點和H11位點是最常用的兩個定點過表達整合位點。
Rosa26是一個基因,可以直接用它的Official Symbol:Gt(ROSA)26Sor。
H11并不是某個基因,而是存在于兩個基因之間的一個特定染色體位置,所以沒有Official Symbol。目前公認的命名是Igs2,表示intergenic site 2的縮寫。
3.修飾方式
tm:對于ES細胞打靶途徑獲得的品系,用tm表示targeted mutation。
em:對于CRISPR/Cas9或Talen等核酸酶系統(tǒng)介導的基因修飾品系,用em表示endonuclease-mediated mutation。
4.編號
這里的編號是指在該實驗室中,對該基因修飾的序列號。
如:C57BL/6Smoc-Trp53em5Smoc表示在Smoc實驗室對Trp53基因進行的第5次突變。
有時候會看到 tm1.1、tm1.2的情況,這又是什么意思呢?
這是指條件性基因敲除小鼠在與生殖系重組酶工具鼠交配后獲得的子代小鼠品系,為了與親代CKO小鼠(編號為tm1)區(qū)分。
5.插入結構
敲入的基因,在括號內寫明插入的外源基因,如:C57BL/6Smoc-Pvalbem1(T2A-iCre)Smoc。
基因敲除和條件性基因敲除,在命名中一般不加入插入結構的部分,即編號后緊跟實驗室代號,如:B6.129-Trp53tm1Smoc。
6.實驗室代號
一般實驗室代號是機構名稱的首字母縮寫。如:Smoc代表Shanghai Model Organisms Center。你們的實驗室有沒有代號呢,可以取一個哦~
轉基因小鼠的命名
這一類小鼠的名稱和上面介紹的略有不同,現(xiàn)在我們就針對其中不一樣的部分進行解讀。
1.轉基因
Tg(Transgene)代表轉基因,如果使用轉座子系統(tǒng)來制備轉基因小鼠的話,那么命名時需在Tg后面加Tn(transposable element)。如:C57BL/6Smoc-Tgtn(pWap-ERBB2)1Smoc
2.轉入結構
在括號中寫明轉入的基因啟動子信息以及Official Symbol。
知道了基因工程小鼠的命名規(guī)則,你可能又要問了,名字這么長總不能每次都寫全名吧?確實,通常在文章中對所用的基因工程小鼠進行表述時,我們可以采用簡寫的方式。但關于簡寫的標準尚無明確規(guī)定,文獻里面也是多種多樣。小編查詢了一些文獻,總結了以下的幾種書寫方式,希望對大家有所幫助。
基因工程小鼠的一般簡寫方式
1.基因敲除
用加、減號上標來表示(上標中“+”代表wild type)。
純合子:Sec16a-/-。
雜合子:Sec16a+/-。
野生型:Sec16a+/+或WT (wild type)。
2.基因敲入
將敲入的元件寫在上標里或者直接用「-」連接。(上標中“+”代表wild type)
Shh基因E177A點突變雜合子:ShhE177A/+。
Shh敲入Cre重組酶基因,可寫成ShhCre/+,或者也可直接寫成Shh-Cre。
Shh敲入報告基因EGFP,可寫成ShhEGFP/+,或者也可直接寫成Shh-EGFP。
對于在安全位點后敲入的,可按下面的例子進行書寫。
Rosa26后敲入CAG-LSL-zsGreen,可寫成R26CAG-LSL-zsGreen/+,或者直接寫成R26-CAG-LSL-zsGreen。當該小鼠與Cre小鼠交配后,Cre介導的重組驅動CAG啟動子轉錄,表達強的zsGreen熒光,則可寫成R26CAG-LSL-zsGreen/+;Dppa3Cre/+,或者直接寫成R26-CAG-LSL-zsGreen;Dppa3-Cre。
3.條件性基因敲除
Flox小鼠,將flox作為上標來表示。(上標中“+”代表wild type)
純合子:Tlr5flox/flox或Tlr5f/f。
雜合子:Tlr5flox/+或Tlr5f/+。
與廣泛表達Cre或生殖系表達Cre工具鼠交配所獲得的全身敲除小鼠,可按基因敲除小鼠的規(guī)則來簡寫。
與組織特異性Cre小鼠交配所獲得的條件性敲除小鼠,則需要分別表示。如:
Tlr5flox/flox小鼠分別與小腸上皮細胞(IEC)特異性Cre(Vil1-Cre)、DC細胞特異性Cre(Cd11c-Cre)交配,所獲得的基因敲除純合子小鼠可以分別表示為Tlr5flox/flox; Vil1-Cre和Tlr5flox/flox;Cd11c-Cre。如果覺得這樣寫太麻煩,也可表示為Tlr5ΔIEC和Tlr5ΔDC。
小編也在一些文獻中看見過其他寫法,如最近的一篇《Nature》中寫的是Lyz2-cre+Aars2fl/fl,Lyz2-cre–Aars2fl/fl,此處的“+”、“-”代表的是Cre陽性和Cre陰性,大家閱讀文獻的時候一定要根據(jù)文章進行判斷,注意不要混淆哦~
原文鏈接:https://www.nature.com/articles/s41586-024-07992-y#Sec11
4.轉基因
一般直接寫出表達的基因結構。
Villin promoter驅動EGFP報告基因的轉基因小鼠就可以表示為Vil-EGFP。
關于基因工程小鼠的命名原則大致先介紹到這里,你掌握了多少呢?收藏本文,需要的時候再拿出來看看吧!
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上海南方模式生物科技股份有限公司(Shanghai Model Organisms Center, Inc.,簡稱"南模生物"),成立于2000年9月,是一家上交所科創(chuàng)板上市高科技生物公司(股票代碼:688265),始終以編輯基因、解碼生命為己任,專注于模式生物領域,打造了以基因修飾動物模型研發(fā)為核心,涵蓋多物種模型構建、飼養(yǎng)繁育、表型分析、藥物臨床前評價等多個技術平臺,致力于為全球高校、科研院所、制藥企業(yè)等客戶提供全方位、一體化的基因修飾動物模型產(chǎn)品解決方案。