γδ T 細(xì)胞：概述與擴(kuò)增培養(yǎng)

摘要： 本文全面闡述了 γδ T 細(xì)胞的基本特性，包括其在免疫系統(tǒng)中的獨(dú)特地位、細(xì)胞表面標(biāo)志物、組織分布等方面的概述，以及目前常用的擴(kuò)增培養(yǎng)方法及其原理、應(yīng)用前景和面臨的挑戰(zhàn)，旨在為深入研究 γδ T 細(xì)胞在免疫治療等領(lǐng)域的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

一、γδ T 細(xì)胞概述
（一）γδ T 細(xì)胞在免疫系統(tǒng)中的地位

γδ T 細(xì)胞是 T 淋巴細(xì)胞的一個(gè)獨(dú)特亞群，與傳統(tǒng)的 αβ T 細(xì)胞在抗原識(shí)別和免疫功能方面存在顯著差異。它們?cè)诠逃忻庖吆瓦m應(yīng)性免疫之間起著橋梁作用，兼具快速應(yīng)答和免疫記憶的特性。γδ T 細(xì)胞能夠在病原體入侵的早期階段迅速被激活，無需依賴主要組織相容性復(fù)合體（MHC）分子的抗原提呈，這使得它們?cè)诘钟�感染方面具有�?dú)特的優(yōu)勢(shì)，能夠?qū)Χ喾N病原體，如細(xì)菌、病毒和寄生蟲等產(chǎn)生免疫反應(yīng)。

（二）細(xì)胞表面標(biāo)志物

γδ T 細(xì)胞表達(dá)特定的 TCRγ 和 TCRδ 鏈，以此區(qū)別于 αβ T 細(xì)胞。不同的 γδ T 細(xì)胞亞群還表達(dá)其他特征性的表面分子，例如，Vγ9Vδ2 T 細(xì)胞亞群通常表達(dá) CD27 和 CD45RO 等標(biāo)志物。這些表面標(biāo)志物不僅有助于識(shí)別 γδ T 細(xì)胞，還與它們的功能分化和活化狀態(tài)密切相關(guān)。

（三）組織分布

γδ T 細(xì)胞廣泛分布于人體的多種組織和器官中，包括外周血、皮膚、腸道黏膜、肝臟、脾臟等。在不同的組織微環(huán)境中，γδ T 細(xì)胞的數(shù)量、亞群組成和功能有所不同。例如，在皮膚中，γδ T 細(xì)胞主要參與皮膚的免疫監(jiān)視和創(chuàng)傷修復(fù)；而在腸道黏膜，它們對(duì)于維持腸道微生物群落的平衡以及抵御腸道病原體感染起著關(guān)鍵作用。

二、γδ T 細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)
（一）擴(kuò)增培養(yǎng)的意義

擴(kuò)增培養(yǎng) γδ T 細(xì)胞對(duì)于深入研究其生物學(xué)功能以及開發(fā)基于 γδ T 細(xì)胞的免疫治療策略具有至關(guān)重要的意義。通過體外擴(kuò)增，可以獲得大量具有特定功能和活性的 γδ T 細(xì)胞，為基礎(chǔ)研究提供充足的細(xì)胞來源，同時(shí)也為臨床免疫治療中 γδ T 細(xì)胞的回輸治療奠定基礎(chǔ)。

（二）常用的擴(kuò)增培養(yǎng)方法
1、基于抗原刺激的擴(kuò)增方法
1）磷酸化抗原刺激：對(duì)于 Vγ9Vδ2 T 細(xì)胞亞群，使用磷酸化抗原如異戊烯焦磷酸（IPP）及其類似物進(jìn)行刺激是一種常用的擴(kuò)增方法。IPP 可與細(xì)胞內(nèi)的抗原呈遞分子結(jié)合，激活 γδ T 細(xì)胞的 TCR 信號(hào)通路，促使其增殖。這種方法能夠特異性地?cái)U(kuò)增 Vγ9Vδ2 T 細(xì)胞，且擴(kuò)增后的細(xì)胞具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性。例如，在腫瘤免疫治療研究中，將從外周血分離得到的 γδ T 細(xì)胞與 IPP 共同培養(yǎng)，經(jīng)過一段時(shí)間后，γδ T 細(xì)胞數(shù)量可顯著增加，并且對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷能力明顯增強(qiáng)。

2）人工合成抗原刺激：一些人工合成的抗原肽也可用于 γδ T 細(xì)胞的擴(kuò)增。這些抗原肽能夠模擬天然抗原與 γδ T 細(xì)胞 TCR 的相互作用，引發(fā)細(xì)胞的活化和增殖。與磷酸化抗原相比，人工合成抗原具有更好的穩(wěn)定性和可操作性，能夠在不同的實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行 γδ T 細(xì)胞的擴(kuò)增培養(yǎng)。

2、細(xì)胞因子介導(dǎo)的擴(kuò)增方法

1）IL - 2 刺激：白細(xì)胞介素 - 2（IL - 2）是 γδ T 細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)中常用的細(xì)胞因子之一。IL - 2 能夠促進(jìn) γδ T 細(xì)胞的存活、增殖和分化。在培養(yǎng)體系中添加適量的 IL - 2，可以維持 γδ T 細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，使其不斷分裂增殖。然而，單獨(dú)使用 IL - 2 進(jìn)行擴(kuò)增可能會(huì)導(dǎo)致 γδ T 細(xì)胞的功能異質(zhì)性增加，因此常與其他抗原或細(xì)胞因子聯(lián)合使用。
2）IL - 15 和 IL - 21 聯(lián)合應(yīng)用：IL - 15 和 IL - 21 與 IL - 2 具有協(xié)同作用。IL - 15 有助于 γδ T 細(xì)胞的長(zhǎng)期存活和自我更新，而 IL - 21 則能夠調(diào)節(jié) γδ T 細(xì)胞的分化方向，增強(qiáng)其細(xì)胞毒性功能。將這三種細(xì)胞因子聯(lián)合應(yīng)用于 γδ T 細(xì)胞的擴(kuò)增培養(yǎng)，可以獲得數(shù)量更多、功能更強(qiáng)大的 γδ T 細(xì)胞群體。例如，在一項(xiàng)針對(duì)腫瘤免疫治療的細(xì)胞培養(yǎng)研究中，采用 IL - 2、IL - 15 和 IL - 21 聯(lián)合培養(yǎng)體系，擴(kuò)增后的 γδ T 細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷效率比單獨(dú)使用 IL - 2 擴(kuò)增的細(xì)胞提高了數(shù)倍。

（三）擴(kuò)增培養(yǎng)面臨的挑戰(zhàn)

1、細(xì)胞純度和功能維持：在擴(kuò)增過程中，如何確保擴(kuò)增得到的 γδ T 細(xì)胞具有高純度，避免其他細(xì)胞類型的污染是一個(gè)關(guān)鍵問題。同時(shí)，隨著擴(kuò)增倍數(shù)的增加，γδ T 細(xì)胞的功能可能會(huì)逐漸下降，如細(xì)胞毒性降低、免疫調(diào)節(jié)功能失衡等。因此，需要優(yōu)化擴(kuò)增培養(yǎng)條件，以維持 γδ T 細(xì)胞的功能特性。
2、大規(guī)模擴(kuò)增的成本和技術(shù)要求：對(duì)于臨床應(yīng)用而言，往往需要大規(guī)模擴(kuò)增 γδ T 細(xì)胞。然而，目前的擴(kuò)增方法在大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)面臨著成本高昂和技術(shù)復(fù)雜的挑戰(zhàn)。例如，一些抗原和細(xì)胞因子的價(jià)格昂貴，且大規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制難度較大。此外，大規(guī)模擴(kuò)增所需的設(shè)備和培養(yǎng)體系也需要進(jìn)一步優(yōu)化和標(biāo)準(zhǔn)化，以提高擴(kuò)增效率和降低成本。

γδ T 細(xì)胞作為免疫系統(tǒng)中的重要組成部分，其獨(dú)特的生物學(xué)特性和免疫功能使其在免疫治療等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。通過不斷優(yōu)化擴(kuò)增培養(yǎng)方法，克服目前面臨的挑戰(zhàn)，有望實(shí)現(xiàn) γδ T 細(xì)胞在臨床治療中的廣泛應(yīng)用，為多種疾病的治療帶來新的突破。

上海逐典細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品

一．細(xì)胞因子

產(chǎn)品特性

• 高生物活性
• 偏向性
  二．PSCprofTM人多能干細(xì)胞消化液

產(chǎn)品特性

• 溫和高效，傳代存活率高
• 可進(jìn)行單細(xì)胞傳代
  三．TryPLUS細(xì)胞消化液

產(chǎn)品特性

• DMF備案
• 非動(dòng)物來源
• 即開即用，方便快捷
• 消化溫和，消化后細(xì)胞活性高
• 無需胰酶抑制劑，稀釋即可終止