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DNA甲基化詳解

瀏覽次數(shù):568 發(fā)布日期:2024-12-16  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
一、表觀遺傳與甲基化 DNA甲基化是最早被發(fā)現(xiàn)、也是研究最深入的表觀遺傳調(diào)控機制之一。 DNA甲基化:在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的作用下,基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶(C)5'碳位共價鍵結(jié)合一個甲基基團。

DNA甲基化能引起染色質(zhì)結(jié)構(gòu)、DNA構(gòu)象、DNA穩(wěn)定性及DNA與蛋白質(zhì)相互作用方式的改變,從而控制基因表達。

二、甲基化研究方法

目前研究中常用的DNA甲基化測序方法包括全基因組(WGBS)、簡化基因組(RRBS)、靶向基因組(液相捕獲)、甲基化DNA免疫沉淀(MeDIP-seq)和芯片等,適用于多種不同應用場景。

1、甲基化發(fā)現(xiàn)階段
Illumina EPIC 芯片(935K):全面覆蓋CpG島、啟 動子等,還包括 島外的CpG位點,已知的DMR位點

全基因組甲基化測序(WGBS):全 基 因 組 覆 蓋 甲 基 化 和 非 甲 基 化

甲基化捕獲測序(MC-seq):啟動子、已知的DMRs、CpG 島、shores

簡化基因組甲基化測序(RRBS):CpG島、啟動子

甲基化DNA免疫沉淀(MeDIP-seq)

2、甲基化驗證階段

焦磷酸測序:焦磷酸測序技術(shù)(pyrosequencing)是一種新型的酶聯(lián)級聯(lián)測序技術(shù),可在一次檢測中快速定量一個或多個甲基化位點,其可重復性和精確性能與SangerDNA測序法相媲美,是目前最理想的驗證方法。同時,焦磷酸測序技術(shù)產(chǎn)品具備對大量樣品進行測序分析的能力,為大通量、低成本、適時、快速、直觀地進行甲基化分析和臨床檢驗提供了平臺。

多重目的區(qū)域甲基化富集測序:多重目的區(qū)域甲基化富集測序,是在全基因組甲基化水平的觀察與研究后,對于眾多目的基因的 甲基化水平的重要研究手段,更有針對性和大樣本可行性。使用亞硫酸氫鹽處理DNA后,結(jié)合目的區(qū)域富集和二代測序技術(shù),利用多重目的區(qū)域甲基化富集測序技術(shù)實現(xiàn)個性化目的區(qū)域甲基化測序,同時大大降低了研究費用。
來源:上海翼和應用生物技術(shù)有限公司
聯(lián)系電話:021-33559491
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