在細胞凍存領(lǐng)域,DMSO一直是細胞凍存中常用的滲透性冷凍保護劑,但其對細胞存在一定的毒性。為了破解這一難題,上海中喬新舟開發(fā)出了一款無DMSO無血清細胞凍存液,為細胞凍存帶來了全新方案!
· 無DMSO,更安全,更高效!
中喬新舟徹底摒棄了傳統(tǒng)凍存液中的DMSO成分,采用了獨特的特殊冷凍保護劑,不僅避免了DMSO對細胞的潛在毒性,還能顯著提升細胞凍存的安全性和穩(wěn)定性,對各種細胞株系都能輕松應對,并且操作簡單,無需程序性降溫,大大節(jié)省了實驗時間和成本。
· 特殊冷凍保護劑,守護細胞每一刻!
中喬新舟的核心技術(shù)在于特殊冷凍保護劑,是市面上第一款使用特殊冷凍技術(shù)的細胞凍存液產(chǎn)品。這種創(chuàng)新成分具有高度的生物相容性,能在冷凍過程中延緩冰晶形成,減少冰晶對細胞結(jié)構(gòu)以及細胞間相互擠壓的損傷,從而最大程度地保護細胞形態(tài)的完整性,大幅提升細胞復蘇后的存活率和活力。
· -80℃長期保存,復蘇更便捷!
中喬新舟無DMSO無血清細胞凍存液可在-80℃條件下對細胞進行長期穩(wěn)定的保存,無需擔心凍存過程中由于設(shè)備問題引起的輕微融化。實驗證明,即使在常溫條件下中喬新舟無DMSO無血清細胞凍存液也可保證細胞在數(shù)小時內(nèi)保持高活性。并且,使用中喬新舟無DMSO無血清細胞凍存液凍存細胞復蘇后無需立即進行離心處理,待傳代時再進行離心處理即可。這一設(shè)計簡化了實驗步驟,提高了實驗效率,讓您的科研工作更加順暢!
凍存效果展示
細胞系 |
中喬新舟凍存液細胞復蘇存活率 |
傳統(tǒng)凍存液 細胞復蘇存活率 |
|
HSF |
人皮膚成纖維細胞 |
92.6% |
90.2% |
GLI261 |
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 |
85.3% |
84.2% |
4T1 |
小鼠乳腺癌細胞 |
91.7% |
85.3% |
K562 |
人慢性髓原白血病細胞 |
92.8% |
92.4% |
HL-60 |
人原髓細胞白血病細胞 |
68.3% |
36.9% |
Caco-2 |
人結(jié)腸腺癌細胞 |
81.3% |
55.1% |
HUVEC |
人臍靜脈內(nèi)皮細胞 |
69.9% |
38.5% |
操作流程
· 細胞凍存步驟
1. 確保細胞處于對數(shù)生長期,常規(guī)方法將細胞懸浮液收集于離心管中。
2. 根據(jù)細胞密度和凍存管尺寸確定所需凍存細胞數(shù)量。將細胞懸浮液置于離心管中,200×g(貼壁細胞)或150×g(懸浮細胞),5分鐘離心后除去上清液,收集細胞沉淀。
3. 在離心管中加入少量中喬新舟細胞凍存液,細胞濃度約為5×104-1×106/μl,輕輕地混勻細胞,制成細胞懸液。
4. 在凍存管中加入10 μL細胞懸液,再加入990 μL細胞凍存液,輕輕混勻。
5. 將凍存管置于37 ℃培養(yǎng)箱中孵育一小時。
6. 孵育完成后,凍存管冷卻至室溫,直接放入-80℃超低溫冰箱中。
7. 如需在液氮中長期保存,可以在-80℃冰箱中放置一天后轉(zhuǎn)移至液氮罐中。
· 細胞復蘇步驟
1. 將細胞凍存管從超低溫環(huán)境中取出,立即放入37℃水域槽中快速解凍。
2. 待細胞混合液完全解凍后,立即加入適量細胞培養(yǎng)基混勻。
3. 將細胞混合液移至培養(yǎng)瓶中。鏡檢后,可根據(jù)需求進行細胞的常規(guī)化培養(yǎng)。
4. 培養(yǎng)2-5天后,將混合液移至離心管中進行離心,200×g(貼壁細胞)或150×g(懸浮細胞),5分鐘離心除去上清液,收集細胞沉淀,重新分散于細胞培養(yǎng)基中。