高效的單細(xì)胞打印技術(shù)加速穩(wěn)定細(xì)胞系的開發(fā)
Fig.1 細(xì)胞株構(gòu)建經(jīng)典流程
傳統(tǒng)的細(xì)胞系開發(fā)的單細(xì)胞分離技術(shù)存在很多缺陷，如分離效率低，細(xì)胞存活率低等。由德國cytena公司開發(fā)的專利的單細(xì)胞打印技術(shù)（SCP technology），通過將單個(gè)細(xì)胞自動分離到標(biāo)準(zhǔn)的96孔板/384孔板中，大大加速抗體細(xì)胞株的開發(fā)且適用于各種細(xì)胞類型。
Fig.2 SCP
自推廣以來，SCP單細(xì)胞打印機(jī)不負(fù)眾望，深受廣大客戶的喜愛，獲得一致好評，全國范圍內(nèi)的demo預(yù)約也是絡(luò)繹不絕，諸如藥明康德、信達(dá)生物、君實(shí)生物、齊魯制藥、昭衍生物、邁百瑞、杭州養(yǎng)生堂、麗珠生物、復(fù)宏漢霖、宜明昂科、澤璟生物、皓陽生物和三優(yōu)生物等幾十家中國知名制藥企業(yè)在demo成功后都紛紛購買設(shè)備。在艾貝泰和客戶的努力下，有的制藥企業(yè)僅一個(gè)月時(shí)間便實(shí)現(xiàn)了儀器從demo試用到設(shè)備安裝，從培訓(xùn)到最終投入使用，大大縮短了細(xì)胞株開發(fā)的時(shí)間。
應(yīng)用案例展示
SCP和有限稀釋（LD）分選單細(xì)胞的效率對比
為了評估SCP分選單細(xì)胞的效率，我們在用SCP分選細(xì)胞后，在day0天統(tǒng)計(jì)了單細(xì)胞的比例，并連續(xù)跟蹤細(xì)胞的生長，在14天時(shí)分析了單細(xì)胞生長起來的克隆率。
Fig.3 比較SCP與LD的單細(xì)胞接種效率
為了避免周邊孔的蒸發(fā)影響細(xì)胞的生長，我們只分選了96孔的中間60個(gè)孔。如圖3所示，SCP實(shí)現(xiàn)了高效的單細(xì)胞接種效率。兩個(gè)細(xì)胞和零個(gè)細(xì)胞發(fā)生的比例非常低。每塊 96 孔板的平均分選時(shí)間為3-5分鐘。經(jīng)SCP分選的每塊孔板中單細(xì)胞率和單克隆生長孔數(shù)顯著優(yōu)于有限稀釋法。不管是單細(xì)胞率還是克隆生長率，SCP都是LCD的 3-4 倍，這意味著有更多的單克隆用于后續(xù)的高產(chǎn)細(xì)胞株篩選。
克隆成活率
在同樣的細(xì)胞株和培養(yǎng)基條件下，我們比較了SCP和LD的單細(xì)胞克隆成活率。
Fig.4 比較SCP與LD的單克隆孔數(shù)
左上圖為經(jīng)SCP分選一塊96孔板在第 14 天的克隆團(tuán)圖像，一共有70個(gè)單細(xì)胞克隆孔。相對地，右上圖為LD處理的微孔板，其中有27個(gè)孔生長出克隆團(tuán)，有7個(gè)孔中含有明顯的兩個(gè)細(xì)胞團(tuán)，只有20個(gè)孔是單細(xì)胞克隆孔。計(jì)算每個(gè)孔內(nèi)的克隆數(shù)目并分成 3 類：空孔，單個(gè)克隆的孔以及多個(gè)克隆的孔。我們觀察到SCP可以產(chǎn)生 73.7% 的單克隆孔（另外有 0% 的孔含多個(gè)克隆，26.3%的孔沒有克�。Ｍ瑫r(shí)，我們發(fā)現(xiàn)LD可以獲得20%的單克隆孔（另外 70.5% 的孔沒有克隆，9.5%的孔含多個(gè)克�。�
類似的案例還有很多，就不在此一一列舉。大家一致好評的是單細(xì)胞打印機(jī)分選快速，操作簡單，單克隆生長率是手動分離的3-4倍。
2020年是不平凡的一年，是大家一起努力抗疫取得勝利的一年，也是我們的單細(xì)胞打印機(jī)普經(jīng)歷練，沉淀口碑的一年。
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2021年是全新的一年，是希望的一年。我們將砥礪前行，讓SCP單細(xì)胞打印機(jī)技術(shù)繼續(xù)在細(xì)胞株開發(fā)領(lǐng)域中開新局、育新機(jī)。
