介紹
準(zhǔn)確、快速地處理通過拭子和FTA卡基質(zhì)收集的血液或口腔樣本對(duì)法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的高效運(yùn)作至關(guān)重要。GlobalFiler™ Express Kit*是一種STR多重檢測(cè)方法，能夠從拭子和FTA卡打孔器以及其他的參考樣本中直接擴(kuò)增。本應(yīng)用說明介紹了如何使用FORMULATRIX公司的MANTIS系統(tǒng)將GlobalFiler™ Express Kit的預(yù)混液分配到帶有經(jīng)處理的口腔FTA卡打孔器的擴(kuò)增板上。
 
材料和方法
在添加 GlobalFiler™ Express Kit 試劑之前，將經(jīng)處理且?guī)в袠悠返?.2 mm紙盤添加到所需數(shù)量的反應(yīng)孔中。根據(jù)供應(yīng)商的說明指導(dǎo)對(duì)GlobalFiler™ Express Kit 試劑進(jìn)行處理，用于對(duì)經(jīng)處理的FTA卡的 26次 循環(huán)直接擴(kuò)增。
 
簡(jiǎn)而言之，通過將每個(gè)樣品的以下體積組合在一起來制備預(yù)混液：6.0 μL 預(yù)混液、6.0 μL 引物組和 3.0 μL 低 TE 緩沖液。使用MANTIS 液體處理器（圖 1）將 15 μL 預(yù)混液分配到 MicroAmp™ 光學(xué) 96 孔反應(yīng)板上。隨后的擴(kuò)增產(chǎn)物在 Applied Biosystems 3500xl 基因分析儀上進(jìn)行處理，并使用 GeneMapper™ ID-X 軟件 v1.4 進(jìn)行分析。

結(jié)果

在 17 次對(duì)經(jīng)處理的口腔FTA卡打孔器的測(cè)試中，每次均使用 26 次循環(huán) PCR 擴(kuò)增生成完整圖譜（圖 2）。 所有擴(kuò)增對(duì)照（兩個(gè)陽性和兩個(gè)陰性對(duì)照）也得到了預(yù)期的結(jié)果。

結(jié)論

GlobalFiler™ Express PCR 擴(kuò)增試劑盒和FORMULATRIX公司的MANTIS 液體處理器的組合創(chuàng)建了一個(gè)用于生成PCR圖譜的高效系統(tǒng)。 GlobalFiler™ Express的化學(xué)反應(yīng)免除了在擴(kuò)增前提取和定量 DNA的需要。MANTIS強(qiáng)大且精確地將 GlobalFiler™ Express 預(yù)混液自動(dòng)分配到擴(kuò)增板上，并通過簡(jiǎn)單易用的軟件控制最小死體積。自動(dòng)打孔機(jī)器人和 LIMS 系統(tǒng)的集成構(gòu)成了一個(gè)完整的系統(tǒng)，用于處理具有完整監(jiān)管鏈的FTA卡打孔器。