簡介
生物藥品審批的監(jiān)管標準一直都在不斷變化。其中用于細胞系單克隆來源的監(jiān)管條例驅使我們要在生物藥物開發(fā)過程中使用更有效的技術或方法。許多研究人員通常使用成像系統(tǒng)(如CloneSelect Imager)在液體培養(yǎng)基中驗證單克隆和監(jiān)控細胞的生長。其實，CloneSelect Imager系統(tǒng)也可以在半固體培養(yǎng)基中對細胞進行成像。細胞在半固體培養(yǎng)基中的位置比較固定，使研究人員可以更加準確地在不同時間點對同一個細胞進行成像。實驗室常規(guī)方法通常使用有限稀釋進行細胞克隆。但是，這種方法使用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞，使追蹤細胞變得比較困難或不夠準確。因為在處理微孔板的過程中，懸浮細胞容易在孔內(nèi)發(fā)生位置移動(Figure1)。不能確保不同時間點成像的 是同一個細胞，從而大大降低單克隆驗證的準確性。此外，有限稀釋有可能在一個孔內(nèi)加入多個細胞，需要進行額外多次亞克隆來提高單克隆的概率。使用半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞給科研人員提供了一個更快更簡單的克隆方法，而且有利于追蹤細胞的生長。細胞在半固體培養(yǎng)基中的位置相對定，在常規(guī)實驗操作過程中細胞位置不會移動，可以生長成獨立單個的細胞克隆。所以，可以在同一個孔內(nèi)種植多個細胞，而且通過不同時間點成像，能夠清晰追蹤單個細胞的生長情況，提供單克隆的數(shù)字驗證數(shù)據(jù)。CloneSelect Imager為研究人員提供了一個在半固體培養(yǎng)基中對細胞進行成像的方法。這個系統(tǒng)使用非侵入性檢測方法，無需標記細胞直接進行成像，可以對細胞生長情況進行準確定量；進行單細胞來源克隆驗證，確保只選擇穩(wěn)定的單克隆用于下游研究。本文通過實際實驗驗證CloneSelect Imager在CloneMedia™CHO Growth A半固體培養(yǎng)基中對懸浮CHO-s細胞的成能。這種半固體培養(yǎng)基成份經(jīng)過專門優(yōu)化，適合各種CHO細胞系的生長。