蜂蜜中鏈霉素和雙氫鏈霉素的測定
鏈霉素和雙氫鏈霉素屬于氨基糖苷類抗生素，對革蘭氏陰性菌具有抑菌活性，可以預防多種動物疾病。在養(yǎng)蜂行業(yè)中，鏈霉素和雙氫鏈霉素能夠有效地治療蜜蜂的腐蛆病，但由于管理和使用的不科學，常造成蜂產(chǎn)品中該類物質(zhì)的殘留。
本實驗參考國標BJS 202103,對樣品前處理進行優(yōu)化后，建立了一個穩(wěn)定可靠，回收率高，且適合動物源性蜂蜜中鏈霉素和雙氫鏈霉素殘留量測定的SPE-UPLC-MS/MS方法。
Copure® HLB，60 mg/3mL準確稱取5 g試樣于50 mL離心管中，加入10 mL 提取液（含2 %三氯乙酸的磷酸鹽緩沖溶液），渦旋混勻1 min，超聲提取10 min，再加入10 mL提取液并定容至25 mL，渦旋混勻1 min后超聲提取5 min，在10000 r/min離心5 min，待凈化。
活化：依次用3 mL甲醇，3 mL水活化Copure® HLB固相萃取小柱；
上樣：取5 mL待凈化液至已活化好的固相萃取小柱；
淋洗：用2mL水淋洗固相萃取小柱兩次，抽干小柱；
洗脫：用1 mL 甲酸-乙腈-水（2:10:88，v:v:v）溶液洗脫，收集洗脫液，用2 %氨化乙腈1 mL定容至2 mL，渦漩，過濾膜，上機測試。
3、標曲制備
選同類型空白樣品，依次加入適量混合標準中間溶液，按照樣品提取和凈化的步驟進行操作，配制成上機濃度分別為2.5 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL的標準曲線。
4、儀器條件
【液相部分】
色譜柱： Hilic
2.1 mm×100 mm,2.7 μm
流動相：A：5 mmol/L乙酸銨溶液（含0.3 %甲酸） B：乙腈（含0.3 %甲酸）
流速：0.3 mL/min
柱溫：35℃
進樣量：10 μL
洗脫程序：梯度洗脫表1
表1 梯度洗脫程序
【質(zhì)譜條件】
離子源：HESI
電噴霧電壓：3500 V
鞘氣壓力：40 arb
輔氣壓力：10 arb
離子傳輸管：350 ℃
輔氣溫度：375 ℃
表2 組分名稱、保留時間及特征離子一覽表（*為定量離子）
5、實驗結(jié)果
【測試數(shù)據(jù)】
表3 加標回收率結(jié)果
【測試色譜圖】
圖1蜂蜜加標樣品總離子流圖（20.0 μg/kg）
6、訂購信息
