24小時長效培養(yǎng)PBMC保障細胞高活性
瀏覽次數(shù):1428 發(fā)布日期:2023-11-16
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一、PBMC細胞簡介
外周血單個核細胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是外周血中具有單個核的細胞,來源于骨髓中的造血干細胞(HSC),
通常主要包括淋巴細胞和單核細胞。單個核細胞的體積、形態(tài)和比重與外周血其他細胞不同,紅細胞和多核白細胞的比重在1.092左右,單個核細胞的比重為1.075-1.090,血小板為1.030-1.035。因此利用一種介于1.075-1.092之間而近于等滲的溶液作密度梯度離心,使一定密度的細胞按相應密度梯度分布,可將各種血細胞與單個核細胞分離。
淋巴細胞又包括T淋巴細胞,B淋巴細胞和NK細胞。其中T淋巴細胞是比例最多的淋巴細胞類型,在胸腺中發(fā)育成熟,主要功能就是執(zhí)行人體的細胞免疫功能,在人體的免疫監(jiān)視中發(fā)揮著重要的作用。B淋巴細胞屬于人體的執(zhí)行體液免疫功能的細胞,B淋巴細胞受抗原刺激以后,能夠發(fā)育成熟為漿細胞,可以分泌各種抗體,發(fā)揮體液免疫功能NK細胞是人體非特異性免疫細胞,也在免疫監(jiān)視中發(fā)揮著重要作用。
單核細胞屬于白細胞的一種,從血液中逸出到組織中就變成了吞噬細胞,也稱為巨噬細胞,在人體的非特異性免疫功能中發(fā)揮著重要的作用。
二、PBMC細胞應用
PBMC是免疫系統(tǒng)的關鍵組成部分,因此在免疫學、傳染病、惡性腫瘤、疫苗研發(fā)、移植治療、個性化醫(yī)學和毒理學領域均作為最基礎的試驗原料被廣泛應用。例如在腫瘤免疫藥物研發(fā)中常用于抗體依賴性細胞毒性(ADCC)、T細胞激活或抑制、CMV Recall、Treg抑制及PBMC構建人源化小鼠等體外試驗,也可用作PBMC-腫瘤細胞共培養(yǎng),突破免疫體外殺傷研究的壁壘。
以ADCC試驗為例,PBMC在其中起主要作用?贵w依賴性細胞毒性試驗,是依靠抗體介導殺傷細胞來殺傷靶細胞。具體過程可理解為:抗體的Fab段結合在靶細胞抗原表位上。抗體的Fc段與NK細胞(因NK細胞是能發(fā)揮ADCC作用的主要細胞,故以此舉例)表面的FcR結合,從而NK細胞活化,穿孔素、顆粒酶被釋放。穿孔素、顆粒酶從靶細胞膜上形成的“孔道”進入胞內,通過激活凋亡相關的酶使靶細胞凋亡。在以上過程中,為了使效應細胞釋放的細胞毒物質充分作用于靶細胞,良好的效應細胞(如新鮮的PBMC)供給在ADCC的研究中是必不可少的。另外,ADCC也常用來評估藥物研發(fā)中抗體的活性有無及強弱,因此一個高質量的PBMC產品用作效應細胞尤為重要。
三、相關評估
技術人員以
0和24時培養(yǎng)為檢測點,測定不同種屬下的細胞活率,結果表明經長時培養(yǎng)后,細胞活率仍可達到75%以上,極好地滿足客戶需求。

人凍存PBMC·24小時培養(yǎng)活率

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多種屬PBMC均經過流式細胞儀利用特定抗體對
T細胞和B細胞內細胞組分進行占比評估,方便客戶直觀地了解常見細胞占比。
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