利用轉(zhuǎn)輪研究動物的晝夜節(jié)律主要分為如下幾個部分:
一、實驗準備
選擇合適的動物:通常選用小鼠、大鼠等模式動物,它們具有明顯的晝夜活動節(jié)律,且易于在實驗室環(huán)境中飼養(yǎng)和觀察。
準備轉(zhuǎn)輪裝置:確保轉(zhuǎn)輪大小適合實驗動物,轉(zhuǎn)動靈活,且配備精確的記錄系統(tǒng),能夠準確記錄轉(zhuǎn)輪的轉(zhuǎn)動次數(shù)、時間等數(shù)據(jù)。將轉(zhuǎn)輪安裝在實驗動物的飼養(yǎng)籠內(nèi),保證動物能夠自由進出轉(zhuǎn)輪。
設(shè)置實驗環(huán)境:將飼養(yǎng)籠放置在光線、溫度、濕度等環(huán)境條件可控的實驗室內(nèi)。設(shè)定固定的光照周期,如 12 小時光照、12 消時黑暗,模擬自然晝夜環(huán)境,并保持溫度在 22 - 25℃,濕度在 40% - 60%,以提供穩(wěn)定的實驗條件。
二、實驗過程
適應(yīng)期:在正式實驗開始前,讓動物在轉(zhuǎn)輪環(huán)境中適應(yīng) 3 - 7 天,使它們熟悉轉(zhuǎn)輪和周圍環(huán)境,減少應(yīng)激反應(yīng)對實驗結(jié)果的影響。在此期間,正常提供食物和水,讓動物自由活動。
數(shù)據(jù)采集期:適應(yīng)期結(jié)束后,開始正式記錄數(shù)據(jù)。持續(xù)記錄動物在轉(zhuǎn)輪中的活動情況,一般以天為單位,記錄多個連續(xù)的晝夜周期。記錄內(nèi)容包括轉(zhuǎn)輪每次轉(zhuǎn)動的時間、轉(zhuǎn)動次數(shù)等信息,通過這些數(shù)據(jù)可以分析動物在不同時間段的活動強度和頻率。
改變實驗條件(可選):在完成基礎(chǔ)數(shù)據(jù)采集后,可以根據(jù)研究目的改變一些實驗條件,如調(diào)整光照時間、改變溫度等,觀察動物在轉(zhuǎn)輪中的活動節(jié)律如何隨環(huán)境變化而改變。例如,將光照時間延長或縮短,觀察動物的活動高峰是否會相應(yīng)地提前或推遲。
三、數(shù)據(jù)分析
繪制活動曲線:根據(jù)記錄的數(shù)據(jù),以時間為橫軸,轉(zhuǎn)輪轉(zhuǎn)動次數(shù)或活動時間為縱軸,繪制動物的活動曲線。通過活動曲線可以直觀地觀察到動物在晝夜不同時間段的活動情況,確定其活動高峰和低谷出現(xiàn)的時間。
計算節(jié)律參數(shù):利用專門的數(shù)據(jù)分析軟件或統(tǒng)計方法,計算動物活動的節(jié)律參數(shù),如晝夜活動周期、活動振幅(即活動高峰與低谷之間的差值)、活動相位(即活動高峰相對于光照 - 黑暗周期的時間位置)等。這些參數(shù)可以定量地描述動物的晝夜節(jié)律特征。
比較不同組別的差異:如果設(shè)置了不同的實驗條件或有多個實驗組,通過統(tǒng)計學分析方法(如方差分析、t 檢驗等)比較各組之間節(jié)律參數(shù)的差異,以確定不同因素對動物晝夜節(jié)律的影響。例如,比較正常光照組和光照改變組動物的活動周期、活動相位等參數(shù),判斷光照變化是否對動物的晝夜節(jié)律產(chǎn)生了顯著影響。