間充質(zhì)干細(xì)胞如何培養(yǎng)？

服務(wù)類別：	分子與細(xì)胞	總訪問：	560
最后更新：	2024-8-26	半年訪問：	55
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服務(wù)商：無錫耐思生命科技股份有限公司

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服務(wù)介紹
公司簡介

什么是干細(xì)胞？
間充質(zhì)干細(xì)胞是干細(xì)胞的一個研究分支。
干細(xì)胞是一類具有自我復(fù)制和多向分化能力的細(xì)胞，它們可以不斷地自我更新，并在特定條件下轉(zhuǎn)變成為一種或多種構(gòu)成人體組織或器官的細(xì)胞。干細(xì)胞是機(jī)體的起源細(xì)胞，是形成人體各種組織器官的始祖細(xì)胞。

什么是間充質(zhì)干細(xì)胞？
間充質(zhì)干細(xì)胞存在于多種組織(如骨髓、臍帶血和臍帶組織、胎盤組織、脂肪組織等），具有多向分化潛力，非造血干細(xì)胞的成體干細(xì)胞。這類干細(xì)胞具有向多種間充質(zhì)系列細(xì)胞（如成骨、成軟骨及成脂肪細(xì)胞等）或非間充質(zhì)系列細(xì)胞分化的潛能，并具有獨特的細(xì)胞因子分泌功能，細(xì)胞模型被應(yīng)用于增殖、移植和分化研究，以及體外的免疫反應(yīng)的鑒定。

間充質(zhì)干細(xì)胞的特性
1. 細(xì)胞具有貼壁依附性

2. 生態(tài)系統(tǒng)失衡特異性表面抗原表達(dá)-陽性和陰性的標(biāo)記物

3. 多能分化，在體外可以分化成成骨，脂肪和軟骨細(xì)胞。

間充質(zhì)干細(xì)胞的用途
1．神經(jīng)系統(tǒng)
間充質(zhì)干細(xì)胞分泌組作為神經(jīng)源性生態(tài)位調(diào)節(jié)劑
2．骨骼系統(tǒng)
間充質(zhì)干細(xì)胞用于控制骨關(guān)節(jié)炎
3．肝臟
間充質(zhì)干細(xì)胞可用于肝臟修復(fù)的治療前景。
4．心臟
間充質(zhì)干細(xì)胞來源的炎性成纖維細(xì)胞可介導(dǎo)衰老心臟的間質(zhì)纖維化。
5. 肺
間充質(zhì)干細(xì)胞來源的微泡在肺疾病中的作用。
6．腎臟
間充質(zhì)干細(xì)胞與慢性腎動脈狹窄。
7．胰腺
使用間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞制備替代β細(xì)胞
8. 腫瘤免疫治療
改造間充質(zhì)干細(xì)胞可為消除腫瘤生長提供持續(xù)濃度的高效特異性抗體。

間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)實驗
試劑：Gibco基礎(chǔ)培養(yǎng)基，Gibco胎牛血清，75%酒精
耗材：Nest 50ml離心管，Nest 10ml血清移液管，Nest T225透氣蓋細(xì)胞培養(yǎng)瓶，Nest 20μl吸頭
設(shè)備：離心機(jī)，水浴鍋，培養(yǎng)箱，移液槍，細(xì)胞計數(shù)儀，顯微鏡
準(zhǔn)備：將胎牛血清按比例適當(dāng)加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，配制成完全培養(yǎng)基。
實驗步驟：
1. 從-196°C液氮罐取出1支間充質(zhì)干細(xì)胞凍存管。

2. 即刻將凍存管置入37°C水浴鍋中勻速擺動，持續(xù)一分鐘左右，使直到管中只剩下最后一片結(jié)晶（注意：不要讓水沒過產(chǎn)品管）。

3. 用酒精擦拭管口。

4. 取20ml完全培養(yǎng)基加入離心管中，將融化好的細(xì)胞懸液加入到完全培養(yǎng)基中并充分混勻。

5. 取20ul混勻好的細(xì)胞懸液，用細(xì)胞計數(shù)儀計數(shù)。

6. 細(xì)胞懸液在1400rpm，室溫條件下，離心5分鐘，去上清。

7. 加入10-20ml完全培養(yǎng)基輕輕混勻細(xì)胞。

8. 每個T225細(xì)胞培養(yǎng)瓶中加入50ml完全培養(yǎng)基。

9. 按10000-15000個細(xì)胞/cm2接種細(xì)胞，平放搖勻使細(xì)胞分布均勻，在顯微鏡下觀察細(xì)胞分布狀態(tài)，放入37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

國內(nèi)領(lǐng)先的生命科學(xué)領(lǐng)域耗材制造商
無錫耐思生命科技股份有限公司（以下簡稱“耐思”）于 2009 年成立，并創(chuàng)立 NEST 品牌，秉持“做高端耗材，創(chuàng)國際知名品牌”的信念，專注于生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的研發(fā)與制造。耐思擁有 7500m² 十萬級潔凈車間，2500m² 萬級潔凈車間，成熟的生產(chǎn)工藝、先進(jìn)的機(jī)器設(shè)備、專業(yè)的研發(fā)中心、資深的管理團(tuán)隊，是國內(nèi)領(lǐng)先的醫(yī)療器械和生命科學(xué)領(lǐng)域耗材制造商。
2020 年，公司正式更名為無錫耐思生命科技股份有限公司。

美國分公司成立
隨著業(yè)務(wù)的發(fā)展，NEST 產(chǎn)品已遠(yuǎn)銷北美、歐洲、日本、韓國、印度等全球多個國家，為了與海外客戶建立深厚的合作關(guān)系，并更快地將產(chǎn)品送到海外客戶手中，我們于2003年在美國新澤西州成了了NEST美國分公司。NEST美國是屬于無錫耐思生命科技股份有限公司的分支機(jī)構(gòu)，擁有一支具有豐富經(jīng)驗和銷售技巧的專業(yè)團(tuán)隊，能與客戶進(jìn)行深入的溝通，更好更快地了解客戶需求，并給予專業(yè)的技術(shù)支持。2022年，NEST美國將在亞利桑那州鳳凰城開設(shè)一個新的48,000英尺的倉庫，隨著新倉庫的落成，將為客戶極大的降低了存儲與物流成本。

引進(jìn)先進(jìn)設(shè)備，確保品質(zhì)穩(wěn)定
耐思為確保質(zhì)量的穩(wěn)定，實現(xiàn)“原料采購 - 生產(chǎn) - 包裝 - 滅菌 - 交付”的無縫對接， 2012年投資1.5億新建了2.7萬平米廠房（無塵潔凈車間），且引進(jìn)國際先進(jìn)電子輻照設(shè)備RhodotronTT200（輻照滅菌流程經(jīng) ISO13485、ISO11137 質(zhì)量體系認(rèn)證），進(jìn)口符合USP CLASS 6的醫(yī)用級原材料，按GMP質(zhì)量管理規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)，現(xiàn)已取得ISO 9001、ISO 13485、ISO 11137、FDA、CE 認(rèn)證及醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證。
2021年NEST新增4500m²十萬級潔凈車間和1500m²萬級潔凈車間，用于醫(yī)療器械與醫(yī)藥包裝耗材的生產(chǎn)。

三大類產(chǎn)品——實驗室耗材、醫(yī)療器械、醫(yī)藥包裝耗材
耐思的產(chǎn)品分為三大類：實驗室耗材（細(xì)胞學(xué)類耗材、微生物檢測類耗材、分子生物學(xué)類耗材、通用耗材類）、醫(yī)療器械和醫(yī)藥包裝耗材。產(chǎn)品適用于醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、輕化工、食品、環(huán)保、生物能源、海洋生物資源、再生醫(yī)學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域，品項多、規(guī)格全，滿足了客戶不同的需求。相比進(jìn)口耗材，NEST 貨期短、品質(zhì)優(yōu)、價格低，可大大提高工作效率并降低使用成本。

定制服務(wù)
無錫耐思生命科技股份有限公司擁有強(qiáng)大的模具設(shè)計能力及機(jī)床精密加工及塑料成型能力，除常規(guī)品的銷售，同時向行業(yè)提供各種定制服務(wù)。

發(fā)展歷程
2009年，成立：創(chuàng)立NEST品牌，從細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品開始研發(fā)
2010年，市場開拓：參加德國慕尼黑，美國PITTCON，正式開始進(jìn)軍海外市場
2011年，通過ISO 9001認(rèn)證
2012年，籌建新工廠
2013年，美國耐思成立：新增分子生物學(xué)耗材，開始研發(fā)細(xì)胞工廠
2014年，新車間投入生產(chǎn)，滅菌中心通過ISO 11137認(rèn)證：投資1.5億新建2.7萬平米廠方，引進(jìn)比利時RhodotronTT200電子束輻照設(shè)備滅菌中心通過ISO11137認(rèn)證
2015年，滅菌中心正式投入使用
2016年，通過ISO 13485認(rèn)證：細(xì)胞工廠驗證完成，正式投放市場
2017年，完善工業(yè)類客戶產(chǎn)品線：細(xì)胞工廠系列、搖瓶系列等產(chǎn)品上市
2018年，優(yōu)化管理，升級設(shè)備，研發(fā)醫(yī)療器械類產(chǎn)品，為獲取醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證而做準(zhǔn)備
2019年，取得醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證，銷量破億
2020年，無錫耐思生命科技股份有限公司成立，開發(fā)新冠防疫物資
2021年，在美國新澤西州新增3300m²倉庫和研發(fā)基地
2022年，在美國亞利桑那州新增4500m²的倉庫，極大的降低了存儲與物流成本
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