抗體穩(wěn)定性好原因及檢測(cè)方法綜述
抗體應(yīng)該是蛋白中屬于比較穩(wěn)定的，其Tm值基本上在70度左右。但是這只是跟其它的蛋白相比，作為生物大分子蛋白的本身屬性，抗體還是存在不穩(wěn)定性，會(huì)失活降解。目前抗體在研發(fā)以及醫(yī)療領(lǐng)域廣泛應(yīng)用，如若其活性變化將造成不可預(yù)知的后果，因此完善的抗體穩(wěn)定性的檢測(cè)方法是目前抗體市場(chǎng)不可或缺，通過(guò)檢測(cè)確定其可用的條件以及有效期限。
一個(gè)抗體產(chǎn)品是否可以投入使用，需要檢測(cè)其以下形狀：
1、抗體活性：是否具有抗體的活性，對(duì)于檢測(cè)抗體來(lái)說(shuō)就是是否可以應(yīng)用于相關(guān)的檢測(cè)如WB、Bio-Plex、ELISA等，而對(duì)于抗體藥來(lái)說(shuō)就是臨床治療是否達(dá)到預(yù)期效果。
2、抗體純度：是否達(dá)到指定純度，可以用于檢測(cè)或治療。
3、抗體濃度：是否達(dá)到保存和使用濃度。
4、產(chǎn)品外觀：是否澄清透明，是否有可見(jiàn)異物。
5、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)：尤其針對(duì)于藥物。
抗體在室溫、37℃保存與-20℃保存具有一樣的活性與穩(wěn)定性。之所以這種抗體具有這樣良好的穩(wěn)定性，主要原因有四個(gè)方面：
1. 抗體純度
高純度的抗體產(chǎn)品，去除了包括各種蛋白酶在內(nèi)的雜質(zhì)，保證了抗體的穩(wěn)定性。采用先進(jìn)的抗體純化技術(shù)，確�？贵w產(chǎn)品的高純度，保障其抗體產(chǎn)品的穩(wěn)定性。
2. 抗體濃度
高濃度的抗體產(chǎn)品可減少容器表面吸附造成的物質(zhì)損失。撫生抗體產(chǎn)品中，93%的濃度大于0.5mg/ml�？贵w產(chǎn)品濃度普遍大于業(yè)內(nèi)水平。
3. 抗體的穩(wěn)定性是自然界長(zhǎng)期進(jìn)化的結(jié)果
抗體是免疫系統(tǒng)中最重要的分子之一，其穩(wěn)定性是自然進(jìn)化篩選的結(jié)果。在眾多物種中，抗體分子形成了保守而穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，分子中70% 氨基酸殘基(免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域)以beta片層(beta-sheet)形式堆疊，形成緊密并能耐受蛋白酶作用的“三明治"結(jié)構(gòu)，輕鏈和重鏈通過(guò)保守的二硫鍵形成具有三個(gè)結(jié)構(gòu)域的免疫球蛋白，大大提高了分子本身的穩(wěn)定性。
4. 抗體分子的高Tm值
有數(shù)據(jù)表明，在70℃時(shí)抗體分子才開(kāi)始明顯地去折疊(unfold)，而這一過(guò)程之前的變化也具有相當(dāng)?shù)目赡嫘�。也就是說(shuō)，在室溫下，甚至短時(shí)間溫度達(dá)到50-60度，抗體分子都能維持正確折疊，保持應(yīng)有的活性。
目前主要有3種檢測(cè)抗體穩(wěn)定性的方法：
1、長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)亦可叫Real time：將抗體存放在實(shí)際保存溫度，在不同的時(shí)間點(diǎn)取出后檢測(cè)其上述抗體特性，如2個(gè)月檢測(cè)一次，直至抗體不再具有相應(yīng)產(chǎn)品特性，此期限則為其有效的使用和保存期限。
2、加速穩(wěn)定實(shí)驗(yàn)：將抗體放入高溫存儲(chǔ)條件，如室溫、37℃等，亦是在不同的時(shí)間點(diǎn)取出后檢測(cè)其上述抗體特性，一般是1天檢測(cè)一次，直至抗體不再具有相應(yīng)產(chǎn)品特性，根據(jù)其抗體在高溫失活的期限推算其在實(shí)際存放條件下的保存和使用期限。
3、反復(fù)凍融：凍融對(duì)抗體活性會(huì)有較大的影響，因此可通過(guò)反復(fù)凍融來(lái)檢測(cè)抗體的穩(wěn)定性，凍融一次檢測(cè)一次，直至抗體不再具有相應(yīng)產(chǎn)品特性。
此外，嚴(yán)格情況下還需要進(jìn)行運(yùn)輸條件的模擬，測(cè)試抗體在其運(yùn)輸過(guò)程中的穩(wěn)定性。
對(duì)于長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)不一定要做到抗體失活為止，但加速穩(wěn)定和反復(fù)凍融一般要求是要做到抗體失活為止。
一個(gè)抗體產(chǎn)品是否可以投入使用，需要檢測(cè)其以下形狀：
1、抗體活性：是否具有抗體的活性，對(duì)于檢測(cè)抗體來(lái)說(shuō)就是是否可以應(yīng)用于相關(guān)的檢測(cè)如WB、Bio-Plex、ELISA等，而對(duì)于抗體藥來(lái)說(shuō)就是臨床治療是否達(dá)到預(yù)期效果。
2、抗體純度：是否達(dá)到指定純度，可以用于檢測(cè)或治療。
3、抗體濃度：是否達(dá)到保存和使用濃度。
4、產(chǎn)品外觀：是否澄清透明，是否有可見(jiàn)異物。
5、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)：尤其針對(duì)于藥物。
抗體在室溫、37℃保存與-20℃保存具有一樣的活性與穩(wěn)定性。之所以這種抗體具有這樣良好的穩(wěn)定性，主要原因有四個(gè)方面：
1. 抗體純度
高純度的抗體產(chǎn)品，去除了包括各種蛋白酶在內(nèi)的雜質(zhì)，保證了抗體的穩(wěn)定性。采用先進(jìn)的抗體純化技術(shù)，確�？贵w產(chǎn)品的高純度，保障其抗體產(chǎn)品的穩(wěn)定性。
2. 抗體濃度
高濃度的抗體產(chǎn)品可減少容器表面吸附造成的物質(zhì)損失。撫生抗體產(chǎn)品中，93%的濃度大于0.5mg/ml�？贵w產(chǎn)品濃度普遍大于業(yè)內(nèi)水平。
3. 抗體的穩(wěn)定性是自然界長(zhǎng)期進(jìn)化的結(jié)果
抗體是免疫系統(tǒng)中最重要的分子之一，其穩(wěn)定性是自然進(jìn)化篩選的結(jié)果。在眾多物種中，抗體分子形成了保守而穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，分子中70% 氨基酸殘基(免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域)以beta片層(beta-sheet)形式堆疊，形成緊密并能耐受蛋白酶作用的“三明治"結(jié)構(gòu)，輕鏈和重鏈通過(guò)保守的二硫鍵形成具有三個(gè)結(jié)構(gòu)域的免疫球蛋白，大大提高了分子本身的穩(wěn)定性。
4. 抗體分子的高Tm值
有數(shù)據(jù)表明，在70℃時(shí)抗體分子才開(kāi)始明顯地去折疊(unfold)，而這一過(guò)程之前的變化也具有相當(dāng)?shù)目赡嫘�。也就是說(shuō)，在室溫下，甚至短時(shí)間溫度達(dá)到50-60度，抗體分子都能維持正確折疊，保持應(yīng)有的活性。
目前主要有3種檢測(cè)抗體穩(wěn)定性的方法：
1、長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)亦可叫Real time：將抗體存放在實(shí)際保存溫度，在不同的時(shí)間點(diǎn)取出后檢測(cè)其上述抗體特性，如2個(gè)月檢測(cè)一次，直至抗體不再具有相應(yīng)產(chǎn)品特性，此期限則為其有效的使用和保存期限。
2、加速穩(wěn)定實(shí)驗(yàn)：將抗體放入高溫存儲(chǔ)條件，如室溫、37℃等，亦是在不同的時(shí)間點(diǎn)取出后檢測(cè)其上述抗體特性，一般是1天檢測(cè)一次，直至抗體不再具有相應(yīng)產(chǎn)品特性，根據(jù)其抗體在高溫失活的期限推算其在實(shí)際存放條件下的保存和使用期限。
3、反復(fù)凍融：凍融對(duì)抗體活性會(huì)有較大的影響，因此可通過(guò)反復(fù)凍融來(lái)檢測(cè)抗體的穩(wěn)定性，凍融一次檢測(cè)一次，直至抗體不再具有相應(yīng)產(chǎn)品特性。
此外，嚴(yán)格情況下還需要進(jìn)行運(yùn)輸條件的模擬，測(cè)試抗體在其運(yùn)輸過(guò)程中的穩(wěn)定性。
對(duì)于長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)不一定要做到抗體失活為止，但加速穩(wěn)定和反復(fù)凍融一般要求是要做到抗體失活為止。
- ELISA試劑盒試驗(yàn)過(guò)程包被的方式、抗原抗體和條件
- CLDN18.2及Claudin家族靶向療法在腫瘤治療中的應(yīng)用進(jìn)展
- 抗體藥物研發(fā)中免疫原性的原因、影響及解決方法
- 偶聯(lián)藥物新技術(shù)ATC的免疫機(jī)制及在腫瘤治療中的應(yīng)用前景
- 噬菌體展示庫(kù)篩選技術(shù)為噬菌體抗體庫(kù)構(gòu)建與展示抗體庫(kù)添翼
- 癌癥疫苗的分類(lèi)、進(jìn)展及未來(lái)臨床轉(zhuǎn)化中的挑戰(zhàn)
- 噬菌體展示技術(shù)在抗體抗原展示、篩選策略和文庫(kù)構(gòu)建等方面的最新進(jìn)展
- MCE直播預(yù)告：銅死亡的機(jī)制探索與醫(yī)學(xué)應(yīng)用
- 2024第九屆疫苗中國(guó)領(lǐng)導(dǎo)者年會(huì)通知
- MCE推出超900種一抗和多種二抗產(chǎn)品，涵蓋熱門(mén)靶點(diǎn)
- 丹納赫將收購(gòu)Abcam以推動(dòng)生命科學(xué)領(lǐng)域研究創(chuàng)新進(jìn)程
- 睿捷生物新學(xué)期新福利，四重優(yōu)惠限時(shí)享
- 佰諾全景科研mIHC病理技術(shù)服務(wù)年中大促銷(xiāo)火熱來(lái)襲
- 西美杰KPL熱銷(xiāo)二抗和底物限時(shí)優(yōu)惠活動(dòng)已啟動(dòng)！
- 美國(guó)Jackson二抗產(chǎn)品暑期促銷(xiāo)
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話(huà)：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com